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저널정보
대한암학회 Cancer Research and Treatment Cancer Research and Treatment 제41권 제2호
발행연도
2009.1
수록면
93 - 99 (7page)

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Purpose : We performed experiments to investigate the change in cellular signaling that occurs during the transformation of a normal cell to a cell capable of cancerous growth, and we did so by using the NIH 3T3 cells that were transformed by transfection with the v-Ha-ras oncogene. Materials and Methods : Parental and v-Ha-ras transfected NIH 3T3 cells were chosen as test systems. The siRNA transfections were performed using Lipofectamine 2000. The cell proliferation reagent WST-1 was used for the quantitative determination of cellular proliferation. Immunoblot analysis was performed using the ECL-Plus chemiluminescent system and a KODAK Image Station 4000R. Results : The v-Ha-ras-transformed cells were found to be significantly more resistant to PP2 treatment, which is a potent inhibitor of the Src family tyrosine kinases, than were the parental cells at earlier times after treatment. However, PP2 induced growth arrest and the senescence-like phenotypes in both cell lines after longer treatment. Furthermore, the Raf-1 kinase of the v-Ha-ras-transformed cells was not affected by the expressed level of Sprouty proteins, which are negative regulators of the MAPK pathway, as evidenced by the failure of siRNA-mediated knockdown of Spry4 to activate Raf-1 kinase. Dephostatin (a tyrosine phosphatase inhibitor) effectively inhibited the proliferation of the v-Ha-ras transformed cells, whereas dephostatin had only a small effect on the parental cells’ proliferation. This implied an inhibitory role for tyrosine phosphatase that is specific to the signaling pathway in the v-Ha-ras transformed cells. Conclusion : Taken together, our results show that the sustained activation of the oncogenic pathways through their resistance to negative feedback regulation might contribute to the transformation of NIH 3T3 cells.
#v-Ha-ras #Transformed cells #Raf-1 #Negative feedback

목차

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Giannoni E / 2005 / Intracellular reactive oxygen species activate Src tyrosine kinase during cell adhesion and anchorage-dependent cell growth / Mol Cell Biol 25 : 6391 ~ 6 google schola Hanke JH / 1996 / Discovery of a novel, potent, and Src family-selcetive tyrosine kinase inhibitor: Study of lck and fynT-dependent T cell activation / J Biol Chem 271 : 695 google schola Heidecker G / 1992 / The role of Raf-1 phosphorylation in signal transduction / Adv Cancer Res 58 : 53 ~ 73 google schola Kiaris H / 1995 / Mutations, expression and genomic instability of the H-ras proto-oncogene in squamous cell carcinomas of the head and neck / Br J Cancer 72 : 123 ~ 128 google schola Kim HJ / 2004 / Modulation of signalling by Sprouty: a developing story / Nat Rev Mol Cell Biol 5 : 441 ~ 450 google schola

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