국내 승인 LM면화의 자연환경 모니터링을 위한 multiplex PCR 개발

이중로

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자료유형: 학술저널

저자정보: 이중로

저널정보: 한국식물생명공학회 Journal of Plant Biotechnology Journal of Plant Biotechnology 제43권 제1호

발행연도: 2016.1

수록면: 91 - 98 (8page)

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The growth area of living modified (LM) cotton has steadily increased every year, since its first commercialization in 1996. Development of environmental risk assessment tools and techniques for LM cotton is required for ecosystem safety. We therefore developed multiplex PCR assays for simultaneous detection of two (MON15985, MON531) and four (GHB614, LLCOTTON25, MON88913 and MON1445) LM cotton events approved in Korea, with event specific primer pairs. The PCR reactions were optimized by using event specific primers of six LM cottons at various concentrations. The reactions allows amplification of estimated amplicons of MON15985 (214 bp), MON531 (270 bp), GHB614 (119 bp), LLCOTTON25 (164 bp), MON88913 (276 bp), and MON1445 (389 bp) from multiplex PCR reactions. The multiplex PCR assay developed allowed that two annealing steps (15 cycles at 55°C and 25 cycles at 60°C) were performed for amplification of distinguished two LM cottons, and only one annealing step (50 cycles at 60°C) was necessary for tetraplex PCR. Primer extension step of all PCR reactions was skipped for time-effective amplification. Our methods suggest that two multiplex PCR assays can be cost-effective and a rapid diagnostic tool for environmental LMO monitoring of six LM cottons.

#LMO #Cotton #Event #Detection #Multiplex PCR

참고문헌 (15)

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Baeumler S / 2015 / A real-time quantitative PCR detection method specific to widestrike transgenic cotton (Event 281-24-236/3006-210-23) / J Agric Food Chem 54:6527~6534

Delobel C / 2009 / Event-specific method for the quantification of cotton MON88913 using real-time PCR - Validation report and protocol

GMO Detection method Database (GMDD)

James C / 2014 / Global status of commercialized biotech/GM crops: 2014

조범호 / 2015 / Multiplex PCR 방법을 이용한 국내 승인 5개 LM 유채의 검출법 개발 / Journal of Plant Biotechnology 42(2):117~122

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