Exploration and functional expression of homologous lipases of Candida antarctica lipase B

Seongsoon Park

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자료유형: 학술저널

저자정보: Seongsoon Park (Sungshin Women’s University)

저널정보: 한국미생물학회 미생물학회지 미생물학회지 제51권 제3호

발행연도: 2015.9

수록면: 187 - 193 (7page)

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Candida (Pseudozyma로도 알려짐) antarctica lipase B(CAL-B)는 학문적으로 그리고 산업적으로 많이 활용되고 있다. CAL-B 자체에 대한 연구는 많이 진행되어온 반면, CAL-B 상동체에 관한 연구는 그리 알려진 바가 없다. 본 연구에서는 단백질 유사성 검색을 통해서 CAL-B의 상동체 탐색을 수행하였고, 6종의 단백질 서열을 찾았다. 해당하는 유전자들을 대장균에 대한 코돈 최적화를 수행하였고, 이를 바탕으로 유전자 합성을 진행하였다. 이들 유전자를 대장균 발현용 벡터에 클로닝한 후, 대장균 내에서 단백질 발현을 시도하여 이들 중 4종의 단백질이 성공적으로 발현되었다. 이들 단백질들이 가수분해 효소로서의 활성이 있는지 확인하기 위해서, 4-nitrophenyl acetate와 4-nitrophenyl butyrate를 반응기질로 하여 가수분해 반응성을 확인하였다. 이들 단백질들의 비활성(specific activity) 값은 (1.3?30) × 10<SUP>-2</SUP> μmol/min/mg로 측정되었고, 이는 CAL-B의 비활성 수치보다는 다소 낮은 값에 해당하였다. (±)-1-phenylethyl acetate의 가수분해 반응에 대한 입체선택성은 이들 상동체 효소들 중에서 Pseudozyma hubeiensis SY62에서 유래된 효소만이 CAL-B의 입체선택성과 유사함이 확인되었다.

#heterologous expression #homology #lipase

참고문헌 (30)

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[학술지(정기간행물)] - Andualema, B / 2012 / Microbial lipases and their industrial applications: review / Biotechnol 11 : 100 ~ 118

[학술지(정기간행물)] - Bateman, A / 2002 / The Pfam protein families database / Nucleic Acids Res 30 : 276 ~ 280

[학술지(정기간행물)] - Blank, K / 2006 / Functional expression of Candida antarctica lipase B in Escherichia coli / J. Biotechnol 125 : 474 ~ 483

[학술지(정기간행물)] - Boekhout, T / 1995 / Pseudozyma Bandoni emend. Boekhout, a genus for yeast-like anamorphs of ustilaginales / J. Gen. Appl. Microbiol 41 : 359 ~ 366

[단행본] - Bornscheuer, U. T / 2006 / Hydrolases in Organic Synthesis / Wiley-VCH

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박성순

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