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송수근 (조선대학교) 유소영 (조선대학교) 김미광 (조선대학교) 김화숙 (전남과학대학) 임선아 (전남과학대학) 김도경 (조선대학교) 박재윤 (조선대학교) 국중기 (조선대학교)
저널정보
한국미생물학회 미생물학회지 미생물학회지 44권 3호
발행연도
2008.9
수록면
212 - 220 (9page)

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본 연구는 Prevotella nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP>에 대한 균주 특이 DNA 프로브라고 보고된 Pn10 프로브의 균주 특이성을 한국인에서 분리된 P. nigrescens의 임상분리 균주를 이용하여 검증하고, P. nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP> 균주특이 PCR 프라이머를 개발하고자 시행되었다. P. nigrescens와 유전학적으로 가장 가까운 Prevotella intermedia를 포함한 구강 내 치주질환 원인균종인 5균종의 표준균주 및 참고균주, 그리고 P. nigrescens와 P. intermedia의 임상분리 균주를 이용하여 Southern blot 분석법을 시행하였다. Southern blot 분석 결과 Pn10 DNA 프로브에 P. nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP> 및 ChDC KB6 두 균주 지놈 DNA가 검출되었다. P. nigrescens KB6 균주에서 Pn10 DNA프로브와 상동성이 있는 부위를 PCR법으로 증폭(KB6-Pn10)하여 클로닝한 다음 Pn10 DNA 프로브와 같이 핵산염기서열을 결정하여 상동성을 비교하였다. 그 결과 Pn10과 KB6-Pn10의 핵산염기서열간의 percent identity는 98.8%였으며, divergence는 0.6%였다. Pn10 DNA 프로브의 핵산염기서열을 바탕으로 두 종류 프라이머 쌍(Pn10-F-AC/ Pn10-R-AC 및 Pn10-F-A/ Pn10-R-A)을 설계 및 제작하여 P. nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP>에 대한 균주 특이성을 PCR법으로 검증하였다. 이들 프라이머 쌍들의 민감도(sensitivity) 조사 결과, 이들은 P. nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP> 지놈 DNA 4 pg까지 검출할 수 있음을 알았다. 이상의 연구 결과를 종합하면, Pn10 DNA 핵산염기서열을 바탕으로 설계된 Pn10-F-AC/ Pn10-R-AC 및 Pn10-F-A/ Pn10-R-A 프라이머 쌍들은 P. nigrescens ATCC 33563<SUP>T</SUP>를 신속 정확하게 검출하는 수 있어, 균주의 보존적 측면에서 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

목차

재료 및 방법
결과
고찰
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ABSTRACT

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