Fluorescein 형광의 pH 의존성을 이용한 lipase 활성 측정방법

박종원; 최석정

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자료유형: 학술저널

저자정보: 박종원 최석정

저널정보: 한국생명과학회 생명과학회지 생명과학회지 제18권 제8호

발행연도: 2008.8

수록면: 1,159 - 1,163 (5page)

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이 연구의 목적은 물-오일 계면에서 특이적인 lipase 활성을 측정할 수 있는 high-throughput assay 방법을 확립하는 것이다. 이 방법은 pH에 따라 형광의 세기가 변하는 fluorescein의 특성을 이용하여 lipase의 작용으로 방출되는 지방산으로 인한 pH 변화를 fluorescein의 형광 변화로 측정하도록 되어 있다. 활성의 측정은 오일 에멀션과 fluorescein 그리고 효소를 포함하는 반응 용액을 반응시키면서 일정한 간격으로 형광을 측정함으로써 이루어진다. 이 방법을 통해 형광의 세기가 효소의 양에 비례하는 속도로 감소하는 것을 관찰할 수 있었으며 시간에 따른 형광 변화 그래프로부터 계산한 반응 속도가 효소의 양에 선형으로 비례한다는 것을 확인할 수 있었다. 또 한 가지 중요한 사실은 assay를 하는데 있어서 pH 6.0-8.0의 범위에서 다른 pH 조건을 사용할 수 있었다는 점이다.

#Lipase #assay #fluorescein #pH

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1. [학술지(정기간행물)] - Beisson, F. / 2000 / Methods for lipase detection and assay: a critical review / Eur. J. Lipid Sci. Technol : 133 ~ 153

2. [학술지(정기간행물)] - Choi, S. J. / 2003 / A colorimetric microplate assay method for high throughput analysis of lipase activity / J. Biochem. Mol. Biol 36 : 417 ~ 420

3. [학술지(정기간행물)] - De Caro, J. / 1995 / Purification and molecular characterization of lamb pregastric lipase / Biochim. Biophys. Acta 1252 : 321 ~ 329

4. [학술지(정기간행물)] - Gupta, R. / 2003 / Lipase assays for conventional and molecular screening: an overview / Biotechnol. Appl. Biochem 37 : 63 ~ 71

5. [학술지(정기간행물)] - Kobayashi, J. / 2007 / Serum lipoprotein lipase mass: clinical significance of its measurement / Clin. Chim. Acta 378 : 7 ~ 12

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박종원

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주요연구분야 자연과학 > 기타 자연과학

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최석정

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