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형광단백질 (green fluorescent protein, GFP)은 생물공정을 살피데 지표 단백질로 유용하게 사용이 된다. 본 연구에서는 쌀세포에서 외래 단백질의 발현양상을 관찰하기 위해서, 표지 단백질로 GFP를 형질전환 후 이것에서 유도된 현탁 세포에서 GFP의 발현 양상을 관찰하였다. 형질전환시 GFP의 발현을 위한 프로모터로 RAmysE를 사용하였으며 이것은 배양액 중에서 당이 고갈되었을 때 강력히 작동된다. 그래서 본 연구에서는 배양액 중에 다양한 슈크로오스 농도로 쌀세포를 배양하여 세포의 성장양태 및 GFP의 발현양에 미치는 영향을 관찰한 결과 세포의 성장은 12%의 당농도에서 7.06g/L로 최적이였으며 GFP는 당을 가장 적게 사용한 3%에서 최적임을 알 수가 있었다. 이것은 세포의 성장과 GFP의 생산에 사용된 당이 반대로 영향을 미침을 알 수가 있었으며 향후 최적의 대량배양을 위해서는 세포의 성장과 산물의 생산시기를 분리한 이단계 배양법이 필요함을 암시한다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
요약
참고문헌
참고문헌 (20)
참고문헌 신청
Cha, H. J., C. F. Wu, J. J. Valdes, G. Rao and W. E. Bentley. 2000. Observations of green fluorescent protein as a fusion partner in genetically engineered Escherichia coli: Monitoring protein expression and solubility. Biotechnol. Bioeng. 67, 565-574.
Cha, H. J., N. G. Dalal, M. Q. Pham, V. N. Vakharia and W. E. Bentley. 1999. Insect larval expression process is optimized by generating fusions with green fluorescent protein. Biotechnol. Bioeng. 65, 316-324.
Choi, H. K., J. S. Son, G. H. Na, S. S. Hong, Y. S. Park and J. Y. Song. 2002. Mass production of Paclitaxel by plant cell culture. Korean J Plant Biotechnol. 29, 59-62.
Doran, P. M. 2000. Foreign protein production in plant tissue cultures. Curr. Opin. in Biotechnol. 11, 199-204.
Huang, N., J. Chandler, B. R. Thomas, N. Koizumi and R. L. Rodriguez. 1993. Metabolic regulation of alpha-amylase gene expression in transgenic cell cultures of rice (Oryza sativa L.). Plant Mol. Biol. 23, 737-747.
Cha, H. J., N. G. Dalal, M. Q. Pham, V. N. Vakharia and W. E. Bentley. 1999. Insect larval expression process is optimized by generating fusions with green fluorescent protein. Biotechnol. Bioeng. 65, 316-324.
Choi, H. K., J. S. Son, G. H. Na, S. S. Hong, Y. S. Park and J. Y. Song. 2002. Mass production of Paclitaxel by plant cell culture. Korean J Plant Biotechnol. 29, 59-62.
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