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논문 기본 정보

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저널정보
대한의생명과학회 대한의생명과학회지 대한의생명과학회지 제2권 제2호
발행연도
1996.12
수록면
231 - 240 (10page)

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인체 혈액 응고 9인자는 간에서 생성되며 461개의 아미노산으로 구성된 당단백질이다. 따라서 인체 혈액응고 9인자 cDNA를 찾기 위해 태아의 간(fetal liver) cDNA library를 PCR(Polymerase Chain reaction) 방법으로 screening 하였으며, 그 결과 ATG개시 코돈으로부터 TAA 종료 코돈까지 포함하는 1.4 kb의 9인자 cDNA를 찾았다. 또한 클론된 9인자 cDNA를 박데리아에서 발현시키기 위해 박테리아 발현 벡터인 pGEX-2T 플라스미드에 클로닝하므로써 pGEX-F9 플라스미드를 제조하였다. pGEX-F9로 형질전환된 E. coli에서 pGEX-F9의 발현을 유도하면 73 KDa 크기의 GST-factor9 융합 단백질이 다량 생성되며, 이 단백질이 혈액 응고 9인자 단백질을 함유하는 융합 단백질임을 혈액 응고 9인자 항체를 이용한 Western blot으로 입증하였다. E. coli에서 발현된 GST-factor 9 융합단백질은 전체 단백질의 약 20%를 차지하며, GST agarose bead를 이용한 one step purificarion 방법을 통해 GST-factor9 융합 단백질을 쉽게 분리할 수 있다.
#Hemophilia B #Factor 9 #Glutathione S-transferase fusion protein #Expression #Escherichia coli

목차

Abstract
INTRODUCTION
MATERIALS AND METHODS
RESULTS
DISCUSSION
Acknowledgements
RERERENCES
= 국문초록 =

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