Studies on the Cold Attenuation and Protective Effects of a Thermostable Newscastle Disease Virus Isolated from Korean Pheasants

곽길한; 한수철; 김태중; 장경수; 전무형; 송희종

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자료유형: 학술저널

저자정보: 곽길한 한수철 김태중 장경수 전무형 송희종

저널정보: 한국가금학회 한국가금학회지 한국가금학회지 제28권 제2호

발행연도: 2001.8

수록면: 83 - 89 (7page)

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열 안정성을 가지고 있는 한국산 꿩에서 분리된 Newcastle disease virus CBP-1주는 9일령 SPF 계태아에 접종되어 37℃에서 배양하는 방법으로 173번(parent주) 누대 배양되었다. 37℃에서 173번 누대 배양된 NDV CBP-1 주를 10일령 계태아에 접종한 후 저온에서 (29℃) 15번 (CA-15) 30번(CA-30) 누대 배양하였다. 저온순화 주인 CA-15주와 CA-30주의 이화학적 성상검사 (열 안정성 실험, 지질 용매에 대한 감수성 실험, 산성 용매에 대한 감수성 실험)와 병원성 실험(MDT, ICPI, IVPI), 온도 감수성 실험, 안전성 실험, 부스터 효과 실험, 방어효과 등을 실험하였고, 37℃에서 173번 누대 배양된 parent주와 비교하였다. 29℃에 적응된 CA-30주는 37℃와 41℃에서 세포 감염력이 parent주와 비교할 때 감소하였다. CA-15주와 CA-30주를 56℃에서 30분, 60분, 120분 동안 처리하였을 때 이들 저온 순화주들은 혈구응집능과 세포 감염력을 상실하였다. parent주와 CA-15, CA-30주는 ethyl ether를 10분간 처리했을 때 혈구응집능과 세포 감염력을 모두 상실하였다. 그러나 parent주와 CA-15, CA-30주는 pH 3.0-glycine HCl 완충액에 60분간 처리하였을 때 혈구응집능을 가지고 있었다. Parent주의 대뇌 병원성 지수와 정맥내 병원성 지수는 각각 1.12, 1.45 이었다. 그러나 CA-30주의 대뇌 병원성 지수와 정맥내 병원성 지수는 각각 0.75, 0.00으로 감소하였다. CA-30주의 안전성은 1일령 병아리에서 실시하였고 parent주와 B-1주와 비교였다. 이들의 안전성은 치사율을 가지고 평가하였다. parent주와 CA-30주와 B-1주의 치사율은 각각 17.5, 12.0, 0.0%이었다. CA-30주가 parent주에 비해 보다 높은 안전성을 보여 주었으나 B-1주에 비해서 아직 높은 치사율을 보여 주고 있었다. 보강 접종 효과 실험은 1일령에 B-1주를 접종하고 2 주령에 CA-30주와 parent주를 각각 접종한 후 4 주령에 강독주인 교정원주를 가지고 공격한 후 2 주간 치사율을 관찰하였다, CA-30주로 보강 접종한 군과 parent 주로 보강 접종한 군의 치사율은 10%와 7.5%를 각각 나타났다. CA-30주와 parent주의 방어 효과는 1 일령에 CA-30주와 parent 주를 각각 접종하고, 2주령에 다시 CA-30주와 parent주로 보강 접종된 4주령 닭에 강독주인 교정원주를 접종하고 2주간 치사율을 관찰하였다. CA-30주 처리군의 치사율은 11.7%이었고, parent주 처리군의 치사율은 20%를 기록하였다. 1일령에 CA-15주와 CA-30주와 B-1주를 접종한 후, 2주후에 혈중항체가를 측정하였을 때 각각 2^(5.00), 2^(9.50), 2^(4.45) HI 역가를 나타내었고, B-1주로 1 일령에 1차 면역된 병아리에 2주에 다시 CA-15주와 CA-30주로 각각 면역시킨 닭에서의 혈중항체가는 2^(7.33), 2^(6.90) HI 역가를 나타내었다. 1 일령에 CA-15주와 CA-30주로 기초 면역된 병아리에 2 주령에 다시 CA-15주와 CA-30주로 각각 2차 면역시킨 닭에서의 HI 혈중항체가는 각각 2^(7.95), 2^(7.33)로 나타났다.

Newcastle disease virus, CBP-1 strain isolated from Korean pheasants was passaged for 173 times by 9-day-old specific pathogenic free(SPF) embryonated eggs at 37℃ (parent strain) and subsequently passaged for 15(cold attenuation (CA)-15) and 30(cold attenuation (CA)-30) times by 10-day-old of commercial broiler chicks embryonated eggs at 29℃, respectively. The physical and chemical properties(sensitivity to lipid solvents, low pH and thermo stability), pathogenicity(mean death time, intracerebral pathogenic index and intravenous pathogenic index), safety, booster or protective effect and characterization of temperature sensitivity were measured in cold attenuated CA-15 or 30 strain and compared to those of parent CBP-1 strain. NDV, CBP-1 CA-30 strain acquired cold attenuation and decreased infectivity at 41℃ compared to those of parent strain grown at 37℃. It lost hemagglutination activity (HA) and cell infectivity at 56℃ for 30, 60, and 120 Min. CA-30 strain treated with ethyl ether also lost its HA and cell infectivity. Both CA-30 and parent strains exhibited a little resistant to HA at pH 3.0 glycine HCl buffer. Intracerebral pathogenic index(ICPI) and intravenous pathogenic index (IVPI) of parent strain were 1.12 and 1.45, but decreased to 0.75 and 0.00 in CA-30 strain, respectively. The safety was evaluated by mortality in chicks inoculated with 10^(4.0)EID_(50)/0.1 ml. The mortalities of parent, CA-30 and commercial B1 strains were 17.5, 12.0 and 0.0%, respectively. The safety of CA-30 strain was higher than that of parent strain. The booster effects of CA-30 strain and parent strain performed in 4-week-old chicks after being vaccinated with primary commercial B1 strain. The mortality of CA-30 strain(10.0%) was higher than that of parent strain(7.5%). To investigate the protective effect, 4-week-old chicks vaccinated two times at 1-day-old and 2-week-old with CA-30 and parent strains, respectively, were challenged with velogenic NDV, Kyojeongwon strain. The mortality of CA-30 strain was 11.7% and parent strain was 20.0% at 6-week-old broiler chicks. After inoculating CA-15, CA-30 and commercial B1 strains at 1-day-old chicks, the antibody titers of these chicks exhibited 2^(5.00), 2^(4.95) and 2^(4.45) HI titer. Chicks inoculated with commercial B1 strain and reinoculated with CA-15 and CA-30 strain showed 2^(7.33) and 2^(6.90) HI titer. Chicks administrated with CA-15 and CA-30 strain twice at one day old and 2 weeks old, respectively, were 2^(7.95) and 2^(7.33) HI titer.

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