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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이정아 (건국대학교, 건국대학교 대학원)

지도교수
강상모
발행연도
2020
저작권
건국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수38

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

초록· 키워드

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Lactobacillus plantarum의 LTA (lipoteichoic acid)는 염증에 대하여 유익한 효과를 나타내며, EPS (exopolysaccharides)는 항산화 활성을 가지고 있다. 또한 독성이 없고, 면역 조절 활성을 나타낸다고 보고하였다. 가열을 통한 paraprobiotic 생산방법은 세포벽을 분해시켜 세포 내부 항산화 물질이 용출되도록 도와주며, 동시에 유산균 균체에 포함된 당류와 단백질이 가열을 통해 항산화능을 가진 maillard reaction product를 생산하는 것이 알려졌다. 최근 프로바이오틱스는 항산화, 항염, 미백 활성을 가지고 있는 동시에 안정성과 낮은 독성을 가지고 있어 새로운 화장품에 첨가되고 있다. 또한 아토피 피부염, 알레르기, 광노화에 대해 유익한 영향을 미친다는 것이 선행연구에서 입증되었다. 이에 본 연구는 세계적으로 건강식품으로써 관심이 집중되고 있는 깍두기 김치에서 분리한 균을 가열을 통하여 사균체화시켜, 천연화장품 소재로서의 가능성을 확인하기 위해 항산화능과 세포실험을 하였다. 먼저 본 연구에서는 전통발효식품인 깍두기 김치로부터 효능성 물질을 생산하는 균주를 screening하였다. 깍두기 시료 100개 중 47개의 L. plantarum를 분리하고 L. plantarum LP299v보다 증식속도가 빠른 8개 균주를 선별하였다. 선별된 젖산균 L. plantarum을 121℃에서 15분간 처리하여 젖산균 사균체를 제조하였다. 대조군은 산업적으로 많이 사용되고 있는 L. plantarum LP299v를 사균체로 하여 항산화능, 멜라닌 생성 억제능 및 항염능을 비교하였다. 그 결과 항산화능에서는 L. plantarum 사균체 중 가장 우수했던 119P는 대조군에 비해 total phenolic compound는 4.87 mg/g of gallic acid 더 높은 수치를 나타내어, 12% 더 높았다(p<.01). 다른 항산화능 측정에서도 119P는 대조군보다 DPPH assay에서 radical 소거능은 9.86%(p<.05), ABTS assay에서 radical 소거능은 7.28%(p<.05)더 우수하였다. 그리고 피부 세포 생리 활성 실험에서는 높은 활성을 갖는 균은 108P와 119P로 나타났으며, 다음과 같은 결과를 보였다. RAW 264.7 macrophage를 이용한 세포독성 실험에서 108P와 119P는 대조군 LP299v보다 각각 21.19%, 21.32% 더 높은 생존율을 나타냈었다. B16F10에서는 contol보다는 각각 6.48%, 3.48% 높은 생존율을 보였다. NO 소거능에서는 대조군 299v보다 각각 18.03%, 21.89% 더 높은 NO 소거능을 보였고, 멜라닌 억제능은 대조군 299v보다 각각 15.00%, 5.47%로 더 높은 수치의 melanin 억제능을 나타냈었다. 따라서 항산화능과 피부 세포 실험에서 모두 우수한 균 119P가 화장품 원료로서 가장 적합하다고 볼 수 있어, 119P를 16S rRNA 분석을 통해 동정한 결과 L. plantarum으로 나타났다.
이와 같이 본 연구에서는 젖산균 L. plantarum 사균체가 안티에이징 효능 및 항염, 멜라닌 억제능에 따른 미백작용에 효과가 있는지 확인하기 위해 항산화능 실험과 피부세포 실험을 한 결과, 화장품 소재로서의 가능성을 확인할 수 있었다. 특히 세포 독성이 거의 없어 매일 사용하는 소모품인 화장품이 갖추어야 할 조건과 천연 화장품 선택 시 기대하는 안전성이 확보되었다. 이를 통해 안전성을 보유한 L. plantarum 119P 사균체는 항산화 및 항노화와 화이트닝과 같은 기능성이 필요한 화장품의 소재로서의 이용 가능성이 있다고 판단되었다.

목차

제1장 서론 1
제1절 젖산균 1
1. Lactic acid bacteria 1
2. Paraprobiotics 3
제2절 피부노화 5
제2장 깍두기에서 분리한 젖산균 Lactobacillus plantarum 사균체의 화장품 소재로서의 항산화 특성 7
제1절 서 론 7
제2절 연구재료 및 방법 11
1. L. plantarum 의 분리 11
2. 증식속도 11
3. L. plantarum 사균체 제조방법 12
4. 항산화능 측정 12
가. DPPH assay 12
나. ABTS assay 12
다. Total phenlic assay 13
라. Total flavonoid assay 13
5. 통계분석 14
제3절 결과 및 고찰 15
1. 증식속도 15
2. 항산화능 18
가. DPPH radical scavenging activity 18
나. ABTS radical scavenging activity 23
다. Total phenlic assay 27
라. Total flavonoid assay 31
제5절 결론 35
제3장 깍두기에서 분리한 젖산균 Lactobacillus plantarum 사균체의 피부 세포 생리 활성 37
제1절 서 론 37
제2절 연구재료 및 방법 41
1. L. plantarum 분리 41
2. 사균체 제조방법 41
3. 사용 세포주 및 세포 배양 42
4. 세포에서의 생리 활성 효과 측정 42
가. Neutral red assay를 통한 세포 독성 측정 42
나. RAW 264.7 macrophage cell을 이용한 항염 효과 측정 43
다. B16F10 melanoma cell을 이용한 미백 효과 측정 44
5. 젖산균 동정 45
6. 통계분석 45
제3절 결과 및 고찰 46
1. NR assay를 통한 세포 생존율 측정 46
2. RAW 264.7 macrophage cell의 NO생성량 측정 52
3. B16F10 melanoma cell의 melanin contents 측정 56
4. 선별한 젖산균의 동정 59
제4절 결론 62
제4장 총 결론 64
참고문헌 70
국문초록 91

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