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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이철화 (대전대학교, 대전대학교 대학원)

지도교수
박양춘
발행연도
2017
저작권
대전대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수11

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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만성폐쇄성폐질환 및 미세먼지 유발 폐손상 동물모델에서 과루행련환의 효과


목적: 과루행련환은 동의보감 해수문에 기재된 처방으로 대전대학교 한방병원 폐계내과에서 만성폐질환의 기본처방으로 활용되고 있어 만성폐쇄성폐질환 및 미세먼지 유발 폐손상 동물모델을 이용하여 그 효능을 평가하고자 하였다.
방법: In vitro 실험으로 RAW264.7 세포를 이용하여 세포독성 및 LPS 자극 후 산화물질, 염증 cytokine에 대하여 ELISA를 시행하였다. Balb/c 생쥐에 LPS와 표준담배 추출물을 투여하여 제작한 COPD 동물모델과 실험적 미세먼지로 유발한 폐손상 동물모델을 이용하여 기관지폐포세척액과 폐조직을 대상으로 cytospin과 유세포 형광염색분석을 통하여 중성구 발현을, ELISA 및 real-time PCR을 이용하여 관련 cytokine을, 조직학적 분석을 통하여 폐손상을 평가하였다.
Results: In vitro 실험에서 과루행련환은 모든 농도에서 세포독성을 보이지 않았고, 30 ㎍/㎖ 이상의 농도에서 NO 생성을 억제하였으며 300 ㎍/㎖ 이상 농도에서 TNF-α, IL-6 발현을 유의하게 억제하였다. COPD 동물모델에서 과루행련환 200 ㎎/㎏ 투여는 기관지폐포세척액에서 호중구, TNF-α, IL-17A 증가를 억제하였고, 폐조직에서 TNF-α와 IL-1β mRNA 발현을 감소시켰으며 조직학적 분석에서 폐손상을 감소시켰다. 미세먼지 유발 폐손상 동물모델에서 과루행련환 200 ㎎/㎏ 투여는 기관지폐포세척액에서 호중구, TNF-α, IL-17A 증가를 억제하였고, 폐조직에서 MUC5AC, TGF-β mRNA 발현을 감소시켰으며 조직학적 분석에서 폐손상을 감소시켰다.
결론: 과루행련환은 만성폐쇄성폐질환 및 미세먼지 유발 폐손상 치료에 활용 가능할 것으로 판단된다.

목차

제1장 서 론 1
제2장 재료 및 방법 3
1. 재 료 3
1) 약재 3
2) 시약 및 기기 3
2. 방 법 4
1) In vitro 실험 4
(1) RAW 264.7세포 4
(2) 세포 독성 4
(3) 항염증 분석 4
2) COPD 및 미세먼지 폐손상 동물모델 7
(1) 동물 7
(2) CSS 및 CFD 의 제조 7
(3) COPD 및 미세먼지 폐손상 모델 8
(4) 기관지폐포 세척액 분리 10
(5) 기관지폐포 세척액 내 총 호중구 세포수 측정 10
(6) 기관지폐포 세척액 내 면역형광세포 염색 11
(7) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA) 11
(8) Real-time Polymerase chain reaction(PCR) 분석 11
(9) Hematoxylin & Eosin 염색 13
3) 통계분석 14
제3장 결 과 15
1. In vitro 15
1) 세포독성 15
2) NO 생성에 미치는 영향 16
3) TNF-α 생성에 미치는 영향 17
4) IL-6 생성에 미치는 영향 18
2. COPD 동물모델에 대한 영향 20
1) BALF 내 neutrophil 증가에 미치는 영향 20
2) BALF 및 폐조직 내 면역세포 활성에 미치는 영향 22
3) BALF 내 TNF-α 생성에 미치는 영향 24
4) BALF 내 IL-17A 생성에 미치는 영향 25
5) BALF 내 MIP2 생성에 미치는 영향 26
6) BALF 내 CXCL-1 생성에 미치는 영향 27
7) 폐조직 내 관련 단백질 mRNA 발현에 미치는 영향 28
8) 폐조직 손상에 미치는 영향 30
3. 미세먼지 폐손상 동물모델에 대한 영향 32
1) BALF 내 neutrophil 증가에 미치는 영향 32
2) BALF 내 면역세포에 미치는 영향 33
3) BALF 내 TNF-α 생성에 미치는 영향 35
4) BALF 내 IL-17A 생성에 미치는 영향 36
5) BALF 내 MIP2 생성에 미치는 영향 37
6) BALF 내 CXCL-1 생성에 미치는 영향 38
7) 폐조직 내 관련 단백질 mRNA 발현에 미치는 영향 39
8) 폐조직 손상에 미치는 영향 41
제4장 고 찰 43
제5장 결 론 49
참 고 문 헌 51
Abstract 58
Acknowledgment 60

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