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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 김영기
- 발행연도
- 2017
- 저작권
- 충북대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수100
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Pseudomonas tolaasii의 다양한 변이주에서 항진균 활성을 갖는 세균성 펩티드 독소 배양액을 분리하고, 이들 독소에의한 푸른곰팡이의 생장 억제 효과를 평가 하였다. P. tolaasii가 생산하는 tolaasin은 1.9 kDa 박테리아 lipodepsipeptide 독소이다. 이 항진균성 펩티드는 재배되는 버섯, 특히, 느타리, 양송이와 같이 수분이 많은 버섯 표면에 갈반병을 유발하는 것으로 알려져있다. 푸른곰팡이(T. harzianum H1)를 항진균 펩티드 생성균주 30종과 대치배양 하였을 때, 항진균 활성이 강한 13종의 균주가 확인되었고, 8종은 약한 활성을 보였다. 버섯을 재배하는 동안 오염된 톱밥배지의 푸른곰팡이 균사에 여러 항진균 펩티드 생산균주의 배양 추출물을 처리하였다. 펩티드를 함유한 배양 추출물은 곰팡이의 성장을 최대 80%까지 억제 하였다. 항진균 펩티드의 활성 상승효과를 알아보기 위하여 P. tolasii 6264와 HK2 또는 HK11의 혼합 추출물의 조합은 단일 처리하였을 때보다 우수항 항진균 활성을 보였다. 이러한 펩티드의 경제적인 대량 생산을 위하여 효율적인 배지의 농도를 연구하였다. PAF 배지의 농도가 50% 일 때, 균주의 성장은 정상이였고, 펩티드 독소의 생산량을 나타내는 용혈 활성도 최대였다. 하지만 경시적 용혈활성은 균주에 따라 달랐다. P. tolaasii 6264 배양액에 의한 용혈활성은 S자 모양이었고, HK4 균주의 경우는 30분 안에 지수적으로 증가하여 100% 용혈을 보였다. 특히 HK5 균주의 경우에는 PAF 배지의 농도에 따라 다르게 나타났다. 배지농도가 25%일 때 용혈활성이 낮은 상태에서 포화되었으며, 50% 배지농도에서 직선적으로 증가하였고, 100% 농도에서는 지수적으로 증가하였다. 배양액의 항진균 활성은 50% 농도에서 최대를 보여, 균주배양액의 항진균 활성은 50%의 배지농도에서 최대치에 도달하여 배지 영양분의 감소로 생산비 절감이 가능함을 확인 하였다.
목차
Ⅰ. 서 론 1Ⅱ. 연구 배경 31. 푸른곰팡이 병 32. 표고버섯의 푸른곰팡이 병 43. 항진균 펩티드와 펩티드 생산균주 5Ⅲ. 재료 및 방법 91. 재료 92. 방법 9(1) 항진균 펩티드 생산균주의 분리 및 보관 9(2) 푸른곰팡이의 분리 및 균주 보관 10(3) ITS 염기서열 분석 12(4) 항진균 펩티드의 분리 12(5) 적혈구 분리 및 용혈활성 측정 13(6) 버섯조직함몰 검정법(pitting test) 13(7) 항진균 활성 측정방법 14(8) 색상선택법 16Ⅳ. 결 과 181. 푸른곰팡이의 수집 및 동정 18(1) ITS(Internal Transcribed Spacer) 염기서열 분석 182. P. tolaasii 균주의 항진균 활성측정 31(1) 단일 항진균 펩티드의 활성 측정 31① PDA 배지상에서 푸른곰팡이 생육 억제 효과 31② 표고버섯 톱밥배지에서 단일 항진균 펩티드의 효과 36(2) 항진균 펩티드 혼합 처리에 의한 상승효과 측정 453. 항진균 펩티드의 생산 최적화 조건 확인 55(1) 배지농도에 따른 균주의 성장 및 활성 측정 55Ⅴ. 고 찰 60Ⅵ. 요 약 63참고문헌 65감사의 글 72
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