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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이문희 (건국대학교, 건국대학교 대학원)

지도교수
박영민
발행연도
2015
저작권
건국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수4

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2017

Neoagarohexaose-mediated activation of dendritic cells via Toll-like receptor 4 leads to stimulation of natural killer cells and enhancement of antitumor immunity
이문희 ,  장종화 ,  윤건영 외 9명 BMB Reports 2017.01 학술저널

2015

Neoagarohexaose activates dendritic cells via TLR4, leading to NK cells stimulation and antitumor immunity : 네오아가로헥사우스의 TLR4 매개 수지상 세포 성숙화로 인한 자연살해 세포 활성화 및 항암 능 유도에 대한 연구
이문희 의학과 2015.01 학위논문

초록· 키워드

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암은 미국 내에서 두 번째로 발병률이 높은 질병으로써 그 치료법으로는 외과수술, 방사선 치료, 화학 요법, 호르몬 요법, 표적화 요법 및 면역치료법 등이 있다. 특히 면역조절기능을 갖는 천연물 유래 다당체를 이용한 면역치료에 대한 연구가 늘어나고 있는 실정이다. 그러나 몇몇 천연물 유래 다당체는 병원균으로 유래되었다는 점에서 실제 응용에 있어 적용에 대한 큰 문제점이 부각되고 있다. 이번 연구가 진행되는데 있어서 가장 핵심이 되는 물질은 β-agarase DagA 분해산물 네오아가로헥사우스 (DP6)로써 다른 종류의 β-agarase 분해산물 네오아가로올리고당의 생물학적 활성에 대한 연구보고는 있지만, DP6의 생리학적 그리고 면역학적 활성에 대한 연구보고는 전혀 없다. 본 연구에서는 DP6가 mitogen-activated protein kinases 그리고 nuclear factor-κB를 활성화시킴으로써 TLR4를 매개로 선천면역세포인 수지상 세포의 성숙화를 유도함을 확인하였다. 또한, 마우스모델을 통하여 DP6를 투여 시 TLR4를 매개로 B16F1 흑색 종 암세포의 성장이 억제되는 것을 증명하였다. DP6에 의한 자연살해세포의 활성화를 in vitro와 in vivo실험으로 확인하였고, DP6로 성숙화된 수지상 세포에 의한 TLR4 매개 자연살해세포의 활성화를 in vitro 실험을 통해 확인하였다. 마지막으로 DP6를 투여한 마우스모델에서 항체를 이용한 세포결핍실험을 통해 자연살해세포가 B16F1 암세포에 있어서 필수적인 요소임을 증명하였다. 이상의 결과들을 통해 천연물 유래 다당체 DP6의 수지상 세포와 자연살해 세포에서 면역활성기능과 B16F1 마우스모델에서 항암 능을 증명하였으며, 나아가 항암제 후보 물질로써 응용가능성을 시사한다.
#beta-agarase #네오아가로헥사우스 #수지상 세포 #TLR4 #자연살해 세포 #B16F1

목차

Chapter 1. Introduction 1
1.1 Neoagarohexaose (DP6) 1
1.2 β-agarase DagA 3
1.3 Dendritic cells (DCs) 4
1.4 Natural-killer (NK) cells 6
1.5 The cross-talk between DCs and NK cells 8
1.6 Natural polysaccharides with antitumor activity 11
1.7 Purpose of this study 12
Chapter 2. Materials and Methods 13
2.1 Mice 13
2.2 Cell lines 13
2.3 Reagents and antibodies 13
2.4 Preparation of DP6 14
2.5 Generation and culture of DCs 14
2.6 Antigen uptake quantification 15
2.7 Cytokine ELISA 15
2.8 Flow cytometry analysis 15
2.9 Western Blot 16
2.10 NK cell isolation by magnetic activated cell sorting (MACS) 16
2.11 Isolation of peritoneal exudate cells 17
2.12 In vivo Ab-mediated depletion of NK cells 17
2.13 Statistical analysis 17
Chapter 3. Results 19
3.1 DagA from Streptomyces coelicolor A3 (2) produces DP6 from agar 19
3.2 DP6 induces the activation of DCs 21
3.3 DP6 induces DC activation via TLR4 25
3.4 DP6 enhances the antitumor immunity in vivo 28
3.5 DP6 generates TLR4-dependent antitumor immunity in vivo 32
3.6 DP6 stimulates NK cells in vitro and in vivo 34
3.7 DP6-activated DCs induce TLR4-dependent NK cell stimulation in vitro 37
3.8 DP6 induces NK cell-mediated antitumor immunity in vivo 41
Chapter 4. Discussion 44
4.1 Natural polysaccharide, DP6 induces DC activation via TLR4 44
4.2 DP6 shows antitumor effect by activating NK cells 45
4.3 The interaction between DCs and NK cells 46
References 48
Abstract (in Korean) 56

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