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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 배우용
- 발행연도
- 2013
- 저작권
- 동아대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수1
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Guinea pig에서 Aminoglycoside에 의해 유도된 나선신경절의 Apoptosis에 대한 Memantine의 효과
Effects of Memantine on Aminoglycoside-induced Apoptosis of spiral ganglion cells
in Guinea Pig
의 학 과 김 보 영
지도교수 배 우 용
서론: 과도한 소음, aminoglycoside 등의 이독성 약물, 노화 등은 내이의 유모세포를 파괴시키고, 이차적으로 나선신경절의 세포자멸사를 유발하는데, 그에 관련된 기전 중 하나가 흥분성 신경전달물질인 glutamate의 과다 분비이다. Glutamate는 나선신경절에 분포하는 NMDA 수용체를 통해 작용하는데, 나선신경절의 손상과 관련이 있을 것이라고 연구되고 있다. 이에 저자는 알쯔하이머 병에서 안전하게 사용 중인 NMDA 수용체 길항제인 memantine이 gentamicin에 의해 유도된 기니픽의 나선신경절의 세포자멸사를 억제할 수 있는지, 억제할 수 있다면 어떤 기전으로 억제시키는지를 알아보고자 하였다.
대상 및 방법: 생후 3-4주 된 기니픽 10마리(20귀)를 이용하였다. 5마리의 기니픽은 한 쪽 귀에 cochleostomy를 통해 gentamicin (40 mg/mL, 2 mL)을 투여하였고(gentamicin treatment group, G), 반대측 귀는 대조군으로 사용하였다(control group, C). 5마리의 기니픽은 같은 방법으로 gentamicin을 투여하였고, gentamicin 투여 1시간과 12시간 전에 복막으로 memantine (20 mg/kg)을 투여하였고(memantine-gentamicin treatment
group, M-G), 반대측 귀는 gentamicin을 투여하지 않고 memantine 처치만 하였다(memantine group, M). 약물 투여 1주일 후 H&E 염색을 통해 나선신경절의 생존 여부를 확인하였고, 나선신경절의 세포자멸사를 확인하기 위하여 TUNEL 염색을 이용하였다. 또한 Memantine에 의해 나선 신경절의 세포자멸사가 억제되는 기전을 알아보기 위하여 Western blot을 통해 FasL, caspase-3, -8, -9 의 활성화 여부를 확인하였다.
결과: G군에서는 C군에 비해 H&E 염색에서 나선신경절 세포의 생존이 줄어들었고, M-G 군에서는 G군에 비해 나선신경절 세포의 생존률이 높았다. TUNEL 염색상 G군에서는 C군에 비해 나선신경절에 TUNEL-positive 세포가 증가하였고, M-G군에서는 G군에 비해 TUNEL-positive 세포가 감소하였다. C군과 M군에서는 H&E 염색과 TUNEL 염색에서 나선신경절의 생존 변화나 세포자멸사는 관찰할 수 없었다. Western blot 결과 G군에서는 FasL, caspase-3, caspase-8, caspase-9 의 활성화가 의미 있게 증가하였고, M-G군에서는 G군에 비해 FasL, caspase-3, caspase-8, caspase-9 의 활성화가 의미 있게 감소하였다.
결론: NMDA 수용체 길항제인 memantine은 gentamicin 에 의해 유도된 나선신경절의 세포자멸사를 줄이는 효과가 있고, 또한 Fas-FasL signaling pathway 및 여러 가지 caspase 활성화가 관계할 것으로 사료된다.
주요어 : 나선신경절, 세포자멸사, Memantine, FasL, Caspase
Effects of Memantine on Aminoglycoside-induced Apoptosis of spiral ganglion cells
in Guinea Pig
의 학 과 김 보 영
지도교수 배 우 용
서론: 과도한 소음, aminoglycoside 등의 이독성 약물, 노화 등은 내이의 유모세포를 파괴시키고, 이차적으로 나선신경절의 세포자멸사를 유발하는데, 그에 관련된 기전 중 하나가 흥분성 신경전달물질인 glutamate의 과다 분비이다. Glutamate는 나선신경절에 분포하는 NMDA 수용체를 통해 작용하는데, 나선신경절의 손상과 관련이 있을 것이라고 연구되고 있다. 이에 저자는 알쯔하이머 병에서 안전하게 사용 중인 NMDA 수용체 길항제인 memantine이 gentamicin에 의해 유도된 기니픽의 나선신경절의 세포자멸사를 억제할 수 있는지, 억제할 수 있다면 어떤 기전으로 억제시키는지를 알아보고자 하였다.
대상 및 방법: 생후 3-4주 된 기니픽 10마리(20귀)를 이용하였다. 5마리의 기니픽은 한 쪽 귀에 cochleostomy를 통해 gentamicin (40 mg/mL, 2 mL)을 투여하였고(gentamicin treatment group, G), 반대측 귀는 대조군으로 사용하였다(control group, C). 5마리의 기니픽은 같은 방법으로 gentamicin을 투여하였고, gentamicin 투여 1시간과 12시간 전에 복막으로 memantine (20 mg/kg)을 투여하였고(memantine-gentamicin treatment
group, M-G), 반대측 귀는 gentamicin을 투여하지 않고 memantine 처치만 하였다(memantine group, M). 약물 투여 1주일 후 H&E 염색을 통해 나선신경절의 생존 여부를 확인하였고, 나선신경절의 세포자멸사를 확인하기 위하여 TUNEL 염색을 이용하였다. 또한 Memantine에 의해 나선 신경절의 세포자멸사가 억제되는 기전을 알아보기 위하여 Western blot을 통해 FasL, caspase-3, -8, -9 의 활성화 여부를 확인하였다.
결과: G군에서는 C군에 비해 H&E 염색에서 나선신경절 세포의 생존이 줄어들었고, M-G 군에서는 G군에 비해 나선신경절 세포의 생존률이 높았다. TUNEL 염색상 G군에서는 C군에 비해 나선신경절에 TUNEL-positive 세포가 증가하였고, M-G군에서는 G군에 비해 TUNEL-positive 세포가 감소하였다. C군과 M군에서는 H&E 염색과 TUNEL 염색에서 나선신경절의 생존 변화나 세포자멸사는 관찰할 수 없었다. Western blot 결과 G군에서는 FasL, caspase-3, caspase-8, caspase-9 의 활성화가 의미 있게 증가하였고, M-G군에서는 G군에 비해 FasL, caspase-3, caspase-8, caspase-9 의 활성화가 의미 있게 감소하였다.
결론: NMDA 수용체 길항제인 memantine은 gentamicin 에 의해 유도된 나선신경절의 세포자멸사를 줄이는 효과가 있고, 또한 Fas-FasL signaling pathway 및 여러 가지 caspase 활성화가 관계할 것으로 사료된다.
주요어 : 나선신경절, 세포자멸사, Memantine, FasL, Caspase
목차
I . Introduction 1II . Materials and Methods 3III. Results 7IV. Discussion 10V. Conclusion 17References 18Abstract 29
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