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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이종빈 (대전대학교, 大田大學校)

발행연도
2013
저작권
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Effects of Bogijetong-Tang on Diabetic-peripheral neuropathy Induced by streptozotocin in the Mouse

Lee Jong bin
Dept. of Oriental Medicine
Graduate school, Daejeon University
(Directed by Prof. Kim Chul-jung, O.M.D., Ph.D.)


Abstract
Objectives : Previous reports have shown that BJT is effective in peripheral neuropathy induced by taxol and crush injury. In this study, we researched the effects of BJT on Diabetic neuropathy induced by STZ in the Mouse.

Methods : We perfomed both in vitro and in vivo experiments to verify the effects of BJT on diabetic neuropathy induced by STZ in mice. Changes in axonal recovery were observed immunofluorescence staining using NF-200, Hoechst33258, S100β, caspase 3 and anti-cdc2. Proliferation and degeneration of schwann cells were investigated by immunofluorescence staining and western blot analyses.

Results : BJT showed considerable effects on neurite outgrowth, axonal regeneration in diabetic neuropathy. BJT contributed the creation of NF-200, GAP-43, Cdc2, phospho-vimentin, β1, active β1, β3 integrin, phospho-Erk1/2 protein.

Conclusions : Through this study, we found that BJT is effective for enhanced axonal regeneration via dynamic regulation of regeneration-associated proteins. Therefore, BJT had a pharmaceutical property enhancing recovery of peripheral nerve induced by diabetic neuropathy and could be a candidate for drug development after more researches.

Key words : Diabetic-peripheralneuropathy, BogiJetong-Tang(BJT), Sciatic nerve, schwann cell, Dorsal root ganglia

목차

목 차
Ⅰ. 서론 1
II. 실험 3
1. 재료 3
1) 동물 3
2) 약재 3
3) 시약 4
4) 기기 5
2. 방법 5
1) In vitro 실험 5
(1) 실험 세포 모델 확립 5
(2) Dorsal root ganglia (DRG) 배양 5
(3) 면역형광염색 6
(4) Neurite outgrowth 측정 7
(5) 조직 sample의 현미경 분석 7
2) In vivo 실험 7
(1) 실험동물 모델 확립 7
(2) 면역형광염색 7
(3) Western blot 분석 9
3) 통계분석 10
III. 결과 11
1. 배양신경세포의 형태적 변화에 미치는 영향 11
1) 신경세포의 축삭돌기 성장 변화에 미치는 영향 11
2) Hoechst 33258 염색 NF-200을 통한 신경세포와 비신경세포 분포 분석 13
2. 말초신경의 반응성에 미치는 영향 14
1) 축삭의 재생반응성 지표물질에 미치는 영향 14
(1) NF-200에 미치는 영향 14
(2) GAP-43에 미치는 영향 15
(3) Western blot 분석에 의한 GAP-43에 미치는 영향 16
(4) 슈반세포에 미치는 영향 17
2) Cdc2 신호경로 관련인자에 미치는 영향 19
(1) Western blot 분석에 의한 Cdc2에 미치는 영향 19
(2) 면역형광염색 분석에 의한 Cdc2 및 S100β에 미치는 영향 20
(3) Western blot 분석에 의한 phospho-vimentin에 미치는 영향 22
(4) 면역형광염색 분석에 의한 phospho-vimentin의 분포에 미치는 영향 23
3) Phospho-Erk 단백질 관련인자에 미치는 영향 25
(1) Western blot 분석에 의한 phospho-Erk에 미치는 영향 25
(2) 면역형광염색 분석에 의한 phospho-Erk의 조직 분포에 미치는 영향 26
(3) Phospho-Erk와 phospho-vimentin 단백질 신호의 중첩성에 미치는 영향 28
4) β integrin 단백질 관련인자에 미치는 영향 29
(1) Western 분석에 의한 β1 integrin에 미치는 영향 29
(2) 면역형광염색분석에 의한 β1 integrin 생성 및 분포에 미치는 영향 30
(3) Western 분석에 의한 active β1 integrin에 미치는 영향 31
(4) 면역형광염색 분석에 의한 active β1 integrin에 미치는 영향 32
(5) β3 integrin에 미치는 영향 34
(6) β3 integrin의 비신경세포와의 연접성에 미치는 영향 35
5) Phospho-Smad에 미치는 영향 36
6) Caspase 3에 미치는 영향 37
IV. 고 찰 38
V. 결 론 48
참고문헌 49
Abstract 56

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