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Na Liu (Henan Agricultural University) Shijun Jiang (Henan Agricultural University) Songli Feng (Henan Agricultural University) Wenyan Shang (Henan Agricultural University) Guozhen Xing (Henan Agricultural University) Rui Qiu (Tobacco Research Institute of Henan Academy of Agricultural Science) Chengjun Li (Tobacco Research Institute of Henan Academy of Agricultural Science) Shujun Li (Tobacco Research Institute of Henan Academy of Agricultural Science) Wenming Zheng (Henan Agricultural University)
저널정보
한국식물병리학회 The Plant Pathology Journal The Plant Pathology Journal 제35권 제2호
발행연도
2019.4
수록면
172 - 177 (6page)

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A duplex PCR method was developed for simultaneous detection and identification of tobacco root rot pathogens Phytophthora nicotianae and Thielaviopsis basicola. The specific primers for P. nicotianae were developed based on its internal transcribed spacer (ITS) regions of ribosomal gene, ras gene and hgd gene, while the specific primers for T. basicola were designed based on its ITS regions and β-tubulin gene. The specificity of the primers was determined using isolates of P. nicotianae, T. basicola and control samples. The results showed that the target pathogens could be detected from diseased tobacco plants by a combination of the specific primers. The sensitivity limitation was 100 fg/μl of pure genomic DNA of the pathogens. This new assay can be applied to screen out target pathogens rapidly and reliably in one PCR and will be an important tool for the identification and precise early prediction of these two destructive diseases of tobacco.

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