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학술저널
저자정보
강승훈 (주식회사 대웅) 민병혁 (인하대학교) 최홍열 (인하대학교) 김동일 (인하대학교)
저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제45권 제2호
발행연도
2017.6
수록면
149 - 154 (6page)
DOI
10.4014/mbl.1703.03002

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본 연구에서는 Bacillus 유래 esterase를 생산할 수 있는재조합 대장균을 사용하여 유가식 배양을 이용한 고농도 균체 배양을 통해 esterase 생산성을 극대화하고자 하였다. 유가식 배양 중 순수 산소의 공급을 통해 용존산소를 30% 이상 유지한 경우와 포도당농도를 1 g/l 이상 유지한 경우 각각 OD600 76 (35.8 g/l DCW)과 OD600 90 (42.4 g/l DCW) 까지 균체량을 증가시킬 수 있었다. 포도당의 공급에도 불구하고 배양 후반에 세포의 성장이 정체되는 현상을 극복하기위해 yeast extract가 강화된 추가 배지의 공급을 시도하였으며, 그 결과 OD600 185 (87.3 g/l DCW)까지 고농도 균체배양이 가능함을 확인하였다. 단백질 생산 수율의 향상을 위해 성장 시기에 따라 induction에 의한 세포 성장과 esterase 생산성을 평가하였고, 그 결과 대수 성장기 후반에 induction 을 유도한 경우 세포 성장 측면에서는 최대 OD600 190 (89 g/l DCW)까지 고농도 균체 배양이 가능함을 확인하였다. Esterase 생산성 측면에서는 대수 성장기 초반에 induction 을 유도한 경우에 비해 최대 5.8배 생산성이 증가됨을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구를 통해 순수산소와 질소원의공급을 통해 확립된 대장균 고밀도 배양방법을 기초로 IPTG 유도시간을 최적화 함으로써 Bacillus 유래 esterase의 최대생산성을 확보할 수 있는 배양방법을 확립하였다.
#Esterase #high cell density fermentation #isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside induction #Escherichia coli

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