복분자 추출물의 항산화 활성 및 지표성분 표준화를 위한 ellagic acid 검증

이정호; 정경옥; 임소연; 이승제

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자료유형: 학술저널

저자정보: 이정호 (순창건강장수연구소) 정경옥 (순창건강장수연구소) 임소연 (순창건강장수연구소) 이승제 (전라북도생물산업진흥원)

저널정보: 한국식품저장유통학회 Food Science and Preservation 한국식품저장유통학회지 제28권 제5호

발행연도: 2021.8

수록면: 663 - 673 (11page)

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복분자를 이용하여 기능성 소재를 개발하기 위한 기초자료를 확보하기 위하여 ellagic acid 성분 함량과 항산화 활성을 측정하였다. 복분자 90℃, 3시간 추출물에서 총페놀 함량이 30.60±1.27 ㎎/g, ABTS 라디칼 소거능(IC50)은 176.49±3.95 ㎍/mL로 측정되었다. HPLC를 이용하여 복분자 물추출물 및 산가수분해물(RCH)의 ellagic acid 함량과 분석법의 검증에 사용된 용매는 0.1% formic acid와 acetonitrile/MeOH (85:15 v/v), C18 ㎎II 컬럼(4.6×250 ㎜, 5 ㎛), 유속 1.0 mL/min, 주입량 10 μL, PDA detector 254 ㎚에서 검출 한계, 정량 한계, 정밀도, 정확성 및 회수율을 측정하였다. Ellagic acid은 다른 물질의 간섭 없이 단일 피크로 분리되었으며, 검출시간 및 피크유지시간이 일치하였다. Ellagic acid와 RCH의 크로마토그램 약 17.9분에서 단일 피크가 검출되어 동일한 물질임을 확인하였으며, PDA spectrum 254 ㎚에서 ellagic acid와 RCH의 최대 흡광도가 일치하여 특이성이 있음을 확인하였다. 검량선의 상관계수(R²)는 0.9999의 직선성이 나타났으며, 검출한계는 0.1330 ㎍/mL 범위, 정량한계 0.4029 ㎍/mL로 나타났다. 일간 정밀성은 12.95-13.48 ㎎/g(RSD: 1.38-3.70%), 실험실내 정밀성은 13.16-13.41 ㎎/g(RSD: 1.19-2.51%)으로 분석되었다. Ellagic acid의 함량은 복분자 물 90℃, 3시간 추출물에서 6.17±0.80 ㎎/g, 5시간 가수분해물에서 19.56±3.56 ㎎/g으로 분석되었으며, 추출시간과 가수분해시간이 증가함에 따라 ellagic acid 함량도 증가하였다. 본 분석방법은 HPLC를 이용하여 복분자 지표물질인 ellagic acid 분석에 적합한 시험법임이 검증되었다.

The content of ellagic acid obtained from the extracts of Rubus occidentalis (RC) and its antioxidant activity were measured to secure basic data for developing functional materials. The extract was prepared by boiling RC in water for 3 h at 90℃. The polyphenol content and 2,2’-azinbis-(3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity (IC50) of RC was 30.60±1.27 ㎎/g and 176±3.95 ㎍/mL, respectively. RC acid hydrolysate (RCH) was analyzed using HPLC and ellagic acid as a marker compound. HPLC was used to separate the content using the following experimental conditions. Gradient solvent made of 0.1% formic acid and acetonitrile/methanol (85:15 v/v) was used with elution solvent gradient. Separation was performed on a C18 MGII column (4.6×250 ㎜, 5 ㎛) and with a 254 ㎚ PDA detector. Limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), precision, accuracy, and recall rate were measured. Ellagic acid and RCH were separated from other substances with a consistent detection time and peak retention time. Ellagic acid and RCH were eluted as a single peak on the chromatogram at approximately about 17.9 min. The maximum absorbance of ellagic acid and RCH was consistent at 254 ㎚ PDA spectrum. These results indicate that ellagic acid and RCH are similar and there are some specific differences. The correlation coefficient (R²) of the calibration curve showed a 0.9999 linearity, 0.1330 ㎍/mL LOD, and 0.4029 ㎍/mL LOQ. Inter-day precision, and intermediate precision were 12.95-13.48 ㎎/g (1.38-3.70% RSD) and 13.16-13.41 ㎎/g (1.19-2.51% RSD), respectively. The ellagic acid and RCH contents were 6.17±0.80 mg/g and 19.56±3.56 ㎎/g, respectively. The content of ellagic acid increased with increasing extraction and hydrolysis time. Our findings suggest that HPLC analysis could be used for validating ellagic acid as a marker compound of RC.

#Rubus occidentalis #ellagic acid #analysis #validation #marker compound

참고문헌 (43)

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안은미 / 2017 / 두릅 추출물의 기능성 원료 표준화를 위한 HPLC 분석법 검증 / 한국식품저장유통학회지 24(6):795~801

채규서 / 2014 / 복분자 추출물의 기능성 원료 표준화를 위한 지표성분 Ellagic acid 분석법 / 산업식품공학 18(4):355~358

최혜란 / 2013 / 복분자 미숙과 물추출물의 콜레스테롤 개선 효과 / 한국식품영양과학회지 42(12):1899~1907

최승현 / 2017 / 목단피 추출물의 Oxypaeoniflorin 및 Paeoniflorin의 분석법 개선 및 검증 / 한국식품영양과학회지 46(9):1091~1096

함하늘 / 2018 / 산구절초, 자소엽, 찔레를 함유한 천연 화장품소재의다성분 동시분석과 항산화활성 / 생약학회지 49(4):312~321

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