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학술저널
저자정보
Giestas, Leticia (REQUIMTE, Departamento de Quimica, Faculdade de Ciencias e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa) Petrov, Vesselin (REQUIMTE, Departamento de Quimica, Faculdade de Ciencias e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa) Baptista, Pedro V. (Centro Investigacao em Genetica Molecular Humana, Seccao Autonoma de Biotecnologia, Faculdade de Ciencias e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa) Lima, Joao Carlos (REQUIMTE, Departamento de Quimica, Faculdade de Ciencias e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa)
저널정보
한국광과학회 Photochemical & photobiological sciences : an international journal Photochemical & photobiological sciences : an international journal 제8권 제8호
발행연도
2009.1
수록면
1,130 - 1,138 (9page)

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FRET can be used as a strategy to assign different simultaneous events in the same sample but "cross-talk" problems are a limitation. Here we present a contribution for the better understanding of the "cross-talk" in FRET experiments that include several pairs in the same sample. Using oligonucleotide probes labeled with fluorescent dyes which can be selectively excited at a specific wavelength, and using target oligonucleotides tagged with a fluorescent dye with specific characteristics that allow only it to emit light upon selective excitation of a specific probe by energy transfer (FRET), we aim to identify the exact probe-target hybridized pair. When using three donors to probe the presence of complementary targets, only 20% of possible donor/acceptor combinations give straightforward signals readily identifiable with the sample composition, while in the remaining cases severe cross-excitation prevents the direct identification of the sample composition. To correctly resolve the samples identity, we developed a theoretical model that enables the unequivocal attribution of a sample composition to a given set of fluorescence signals, in the presence of three donors.

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