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학술저널
저자정보
신복규 (Laboratory of Biomodulation, Natural Products Research Center, KIST Gangneung Institute of Natural Products) 정유진 (Laboratory of Biomodulation, Natural Products Research Center, KIST Gangneung Institute of Natural Products) 김상민 (Laboratory of Biomodulation, Natural Products Research Center, KIST Gangneung Institute of Natural Products) 판철호 (Laboratory of Biomodulation, Natural Products Research Center, KIST Gangneung Institute of Natural Products)
저널정보
한국응용생명화학회 Journal of applied biological chemistry Journal of applied biological chemistry 제58권 제3호
발행연도
2015.1
수록면
273 - 279 (7page)

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해양 미세조류인 Phaeodactylum tricornutum은 게놈 염기서열이 완전히 밝혀진 규조류로서, 형질전환 방법이 개발되어 있고, 여러 가지 분자생물학적 연구 기술이 개발되어 규조류 연구에서 모델 종으로 여겨지고 있다. 본 연구의 목적은 methylerythritol phosphate (MEP) 대사경로의 마지막 효소인 (E)-4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase (HDR)를 코딩하는 P. tricornutum의 Pthdr 유전자를 P. tricornutum에 도입하여 형질전환체를 확보하는 것이다. 유전자 도입 방법은 gold microcarrier를 사용한 bombardment 방법을 사용하였고, 형질전환 유무 및 목적 유전자의 전사체 확인에는 각각 genomic DNA-PCR 및 cDNA-PCR 방법을 사용하였다. 양성대조군으로 egfp 유전자를 P. tricornutum에 도입하여 최종적으로 eGFP 단백질이 발현되는 것을 형광 공초점 현미경을 통해 확인하였다. 이를 바탕으로, 확보된 Pthdr 형질전환체에서도 도입한 Pthdr 유전자로부터 발현된 PtHDR 효소도 잘 발현될 것으로 추측할 수 있었다. 이렇게 준비된 Pthdr 형질전환체는 추후 연구를 통해, P. tricornum의 유용물질인 카로티노이드의 생합성 과정 연구 및 고부가가치 카로티노이드 과발현 균주 개발 등에 유용한 정보를 제공할 것으로 기대된다.
#형질전환

목차

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참고문헌 (40)

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Altincicek B / 2002 / LytB protein catalyzes the terminal step of the 2-C-methyl-Derythritol-4-phosphate pathway of isoprenoid biosynthesis / FEBS Lett 532:437~440 google schola Apt KE / 1996 / Stable nuclear transformation of the diatomPhaeodactylum tricornutum / Mol Gene Genet 252:572~579 google schola Borowitzka MA / 1978 / The Polymorphic Diatom Phaeodactylum tricornutum: Ultrastructure of Its Morphotypes1, 2 / J Phycol 14:10~21 google schola Bowler C / 2008 / The Phaeodactylum genome reveals the evolutionary history of diatom genomes / Nature 456:239~244 google schola Cerutti H / 2011 / RNA-mediated silencing in algae: biological roles and tools for analysis of gene function / Eukaryot Cell 10:1164~1172 google schola

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