Improved Phosphotyrosine Analysis by TLC and HPLC

Song, Young-Me; Yoo, Gyurng-Soo; Lee, Seung-Ki; Choi, Jung-Kap

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저자정보: Song, Young-Me (College of Pharmacy, Chonnam National University) Yoo, Gyurng-Soo (College of Pharmacy, Chonnam National University) Lee, Seung-Ki (College of Pharmacy, Seoul National University) Choi, Jung-Kap (College of Pharmacy, Chonnam National University)

저널정보: 대한약학회 Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea 제16권 제2호

발행연도: 1993.1

수록면: 99 - 103 (5page)

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We describe here the conditions of thin layer chromatography (TLC) and high pressures liquid chromatography (HPLC) to improve the analytical method of phosphotyrosine (p-Tyr) in biological sample. TLC was performed on silica plate with the mixture of propanol and water (2.1 : 1 v/v) as a mobile phase and $R_1$ values were 0.42, 0.39 and 0.33 for phosphotyrosine, phosphothreonine and phosphoserine, respectively. HPLC was performed on $NH_2$ column with a mobile phase of potassium biphosphate solution by UV deterction at 192 nm. The optimum condition of HPLC was obtained at 0.01 M, pH 4.5 with a clear separation within 12 min. These procedures have been applied to the analysis of phosphotyrosine obtained from tyrosine-phosphorylated enolase. Both TLC and HPLC methods were suitable to analyze tyrosine-phosphorylated protein without being affected by contaminants from hydrolysates.

#Phosphotyrosine #Phosphoamino acids #Phosphorylated protein #TLC #HPLC

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