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학술저널
저자정보
Choi, Jeongeun (Doping Control Center, Korea Institute of Science and Technology) Choi, Myung-Ja (Doping Control Center, Korea Institute of Science and Technology) Kim, Choonmi (College of Pharmacy, Ewha Womans University) Cho, Young-Shik (Department of Diagnostic Products, Korea Green Cross Corporation) Chin, Jaeho (Doping Control Center, Korea Institute of Science and Technology) Jo, Young-Ah (Doping Control Center, Korea Institute of Science and Technology)
저널정보
대한약학회 Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea Archives of pharmacal research : a publication of the Pharmaceutical Society of Korea 제20권 제1호
발행연도
1997.1
수록면
46 - 52 (7page)

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To obtain more sensitive immunoassay for methamphetamine (MA) determination, the optimum condition of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was investigated in regard to immunogens, antibody purification methods and coating tracers. Activated MA, N-(4-aminobutyl)methamphetamine (4-ABMA), was conjugated with bovine serum albumin (BSA) or keyhole limpet hemocyanin (KLH) and used as immunogen. The antibodies were purified by protein G chromatography or various immunoaffinity chromatography-linked MA-protein ligands, such as MA-BSA, MA-KLH or MA-ovalbumin (OVA). Each purified antibody was characterized by means of sensitivity and cross-reactivity using the three MA-protein coating tracers, MA-BSA, MA-KLH and MA-OVA. The best sensitivity of each antibody was acquired with the MA-OVA tracer although the tracer concentration and the antibody titer level at optimum condition were varied. The antibody with high titer level did not always yield good sensitivity. At optimum condition, immunoaffinity chromatography-purified antibodies were better for sensitivity and for specificity than protein G-purified antibodies. The cross-reactivity of the purified antibodies seemed to be affected by immunogen structure and showed somewhat different patterns according to the immunoaffinity ligand utilized. These data show that the antibody purification method as well as choice of coating tracer and immunogen is essential for the sensitivity and specificity of EIA; the optimum condition for assay should be discovered using various methods and combinations.
#Methamphetamine #ELISA #Antibody purification method #Coating tracer #Optimization

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