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저자정보
전병균 (경상대학교 축산학과) 김윤연 (경상대학교 축산학과) 정기화 (축산기술연구소 사천지소) 곽대오 (경상대학교 사범대학 과학교육과) 이효종 (경상대학교 수의과대학 수의학과) 최상용 (경상대학교 수의과대학 수의학과) 박충생 (경상대학교 축산학과)
저널정보
한국동물번식학회 한국동물번식학회지 한국동물번식학회지 제21권 제3호
발행연도
1997.1
수록면
229 - 238 (10page)

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Chromosome condensation and swelling of the donor nucleus have been known as the early morphological indicators of chromatin remodelling after injection of a foreign nucleus into an enucleated recipient cytoplasm. The effects of non-preactivation and electrical preactivation of recipient cytoplasm, prior to fusing a donor nucleus, on the profile of nuclear remodelling in the nuclear transplant rabbit embryos were evaluated. The embryos of 16-cell stage were collected and synchronized to G1 phase of 32-cell stage. The recipient cytoplasms were obtained by removing the first polar body and chromosome mass by non-disruptive microsurgical procedure. The separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were injected into non-preactivated recipient cytoplasms. Otherwise, the enucleated recipient cytoplasms were preactivated by electrical stimulation and the separated G1 phase blastomeres of 32-cell stage were injected. After culture until 20h post-hCG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused by electrical stimulation. The nuclei of nuclear transplant embryos fused into non-preactivated and/or preactivated recipient cytoplasm were stained by Hoechst 33342 at 0, 1.5, 2, 4, 6, 8, 10 hrs post-fusion and were observed under an fluorescence microscopy. Accurate measurements of nuclear diameter were revealed with an ocular micrometer at 200$\times$. Upon blastomere fusion into non-preactivated recipient cytoplasm, a prematurely chromosome condensation at 1.5 hrs post-fusion and nuclear swelling at 8 hrs post-fusion were occurred as 91.6% and 86.1%, respectively. But the nuclei of nuclear transplant embryos fused into preactivated recipient cytoplasm, as o, pp.sed to non-preactivated recipient cytoplasm, were not occurred chromosome condensation and extensive nuclear swelling. Nuclear diameter fused into non-preactivated and preactivated recipient cytoplasm at hrs post-fusion was 30.2$\pm$0.74 and 15.2$\pm$1.32${\mu}{\textrm}{m}$, respectively. These results indicated that onset of unclear condensation and swelling which was associated with oocytes activation were critical steps in the process of chromatin swelling. Futhermore, complete reprogramming seemed only possible after remodelling of the donor nucleus by chromosome condensation and nuclear swelling.
#Rabbit nuclear transfer #Preactivation #Nuclear remodelling #Recipient cytoplasm

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