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저널정보
한국축산학회(구 한국동물자원과학회) 한국축산학회지 한국축산학회지 제47권 제1호
발행연도
2005.1
수록면
19 - 28 (10page)

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본 연구는 돼지 지방세포 원형질막 단백질을 면양에게 수동면역 주사하여 생산한 다클론항체의 조직특이성을 확인하고, 돼지 지방세포에 대한 세포 독성효과를 검정하기 위해 실시되었다. 지방세포, 뇌, 심장, 신장, 간장 및 비장의 원형질막 단백질을 32% sucrose gradient를 이용해 분리하였으며, 지방세포 원형질막 단백질을 성숙한 수컷 면양에 3주 간격으로 3회 면역주사 한 뒤, 마지막 면역주사 이후 10일, 12일 및 14일에 혈액을 채취하여 항혈청을 생산하였다. ELISA 분석 결과, 생산한 항혈청은 지방세포 원형질막 단백질에 대해 81,000배의 희석배율에서도 감지될 수 있을 만큼 강한 반응을 나타내었으나, 기타 주요장기(뇌, 심장, 신장, 간장, 및 비장)와는 미약한 반응을 나타내었다. 이러한 항혈청의 조직특이성은 anti-sheep immunoglobulin G-alkaline phosphatase를 secondary antibody로 사용한 Western immunoblot 분석에서도 재확인 할 수 있었다. Anti-sheep immunoglobulin G-FITC를 이용한 면역조직화학기법의 결과로 본 연구에서 생산한 항혈청이 돼지 지방세포 원형질막 표면에 강하게 결함하고 있음을 확인할 수 있었으며, 실제 배양중인 돼지 지방세포에 항혈청을 처리한 결과, 세포질 내 표지 효소인 lactate dehydrogenase(LDH)가 현저하게 증가한 반면 normal sheep serum을 처리한 지방세포에서는 LDH의 방출이 상대적으로 낮게 나타나, 본 연구에서 생산한 항혈청의 강한 in vitro 세포독성을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들은 면역학적 기법을 이용해 돼지의 체지방 함량을 감소시킬 수 있다는 가능성을 나타내는 것으로 생각된다.

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