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저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제14권 제2호
발행연도
2004.1
수록면
284 - 289 (6page)

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A PCR assay for the rapid detection of Vibriovulnificus strains was developed using a virulence gene forelastase found in various Vibrio species. The DNA sequencesin the elastase gene facilitated the identification of a speciesspecificprobe for pathogenic V. vulnificus strains from bothclinical and environmental sources. Using an elastase genebasedPCR reaction, a species-specific 507-bp PCR productwas visualized by agarose gel electrophoresis. Three differentDNA extraction methods were then compared to improve thesimplicity and rapidity of detection. A PCR assay using theconventional DNA extraction or boiling method was able todetect as few as 25 V. vulnificus cells, making the detectionlimits at least 1-log-scale lower than that for the EDTAtreatedDNA extraction method. In particular, the boilingmethod, which does not require purification of the chromosomalDNA, was very effective in terms of simple and rapiddetection. Meanwhile, the detection limit in a mixed bacterialculture that included other bacteria, such as Escherichia colior Bacillus subtilis, was two V. vulnificus cells, which was 1-log-scale lower than that for the control. Accordingly, whencoupled with a new DNA extraction method, the elastasegene-based PCR can provide a rapid, specific, and sensitivemethod for identifying V. vulnificus in clinical and environmentalsamples.
#Detection #Vibrio vulnificus #PCR #elastaseVibrio vulnificus #a halophilic marine vibrio #is an opportunistichuman pathogen that can cause fatal primary septicemiaand severe wound infections. The primary septicemiacaused by V. vulnificus results in

목차

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참고문헌 (25)

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A / 1987 / Virulent strains of Vibriovulnificus isolated from estuaries of the United States WestCoast : 1349 ~ 1351 google schola A / 1991 / Useof the polymerase chain reaction in detection of culturableand nonculturable Vibrio vulnificus cells : 2651 ~ 2655 google schola Arias / 1995 / Nested PCRmethod for rapid and sensitive detection of Vibrio vulnificusin fish, sediments, and water 61 : 3476 ~ 3478 google schola Cheng / 1996 / Cloning andnucleotide sequencing of the protease gene of Vibriovulnificus 183 : 255 ~ 257 google schola Coleman / 1996 / Detection of V vulnificus biotypes 1 and 2in eels and oysters by PCR amplification 62 : 1378 ~ 1382 google schola

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