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In order to induce high levels of protein secretion,we have constructed a recombinant plasmid, designatedpBP244, into which was incorporated key components of thetype-II Sec-dependent secretion system, including LepB(signal peptidase), SecA (ATPase), and SecB (chaperone).The biological activities of the LepB, SecA, and SecBcomponents expressed from genes harbored by pBP244protein secretion, a pspA (Streptoccus pneumoniae surfaceprotein A) gene was cloned into pBP244, resulting inpBP438. S. typhimurium harboring pBP438 grown until thestationary phase, secreted a higher level of PspA into theculture supernatants than did the strain harboring pYA3494.The strain harboring pBP438 secreted a supernatant amountmembrane amount 1.49-fold higher than that of pYA3494.S. typhimurium χ8554 kept the Asd+ plasmid pBP244 andpBP438 for 60 generations in LB broth harboring DAP,thereby indicating that pBP244 and pBP438 were quite stablein the Salmonella strain.

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