전신성홍반성루푸스에서 자가항체에 의한                                  호중구 세포자멸사의 증가

원동일; 서장수; 김현숙

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자료유형: 학술저널

저자정보: 원동일 서장수 김현숙

저널정보: 대한진단검사의학회 Annals of Laboratory Medicine Annals of Laboratory Medicine 제24권 제6호

발행연도: 2004.1

수록면: 405 - 414 (10page)

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배경 : 전신성홍반성루푸스(systemic lupus erythematosus,SLE) 환자에서는 혈청 성분에 의해 호중구에 대한 세포자멸사와괴사가 증가한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 그 성분 중 하나가 항 dsDNA 항체 등의 자가항체임을 증명하고, 또한 질병 활성도를 평가하기 위한 임상검사로서 SLE 혈청에서 호중구에 대한세포독성과 자가항체 결합을 동시에 측정하는 검사법이 유용한지그 가능성을 조사하였다.방법 : 루푸스신염(lupus nephritis, LN) 환자 48명, LN이 없는 SLE 19명, 류마티스관절염(rheumatoid arthritis, RA) 환자35명 및 건강한 남자 성인 40명으로부터 얻은 총 28개의 혈청을대상으로 하였다. 시험할 혈청에 건강인의 전혈을 가하여 배양하였다. 20시간 배양 후 혹은 배양 조건을 변화시켜 호중구에 대한자가항체 결합과 세포자멸사, 괴사에 대하여 IgG-FITC와 7-ami-noactinomycin D를 사용하여 유세포분석법으로 측정하였고, 결과는 측정치의 시험/건강 대조 비(ratio)로써나타내었다. 이 결과와항 dsDNA 항체와의 관계를 조사하였다.결과 : IgG 평균형광강도(mean fluorescence intensity, MFI)비(MFI ratio)는 건강인군, RA군, SLE군, LN군에서 각각 1.0±0.3, 1.6± 1.6, 2.0± 1.5, 4.8± 7.5로서 루푸스신염군에서 건강인군에 비하여 유의하게 증가하였다(각 N=20, P<0.05). 네 군에서세포자멸사와 괴사 비(apoptosis & necrosis ratio)는 각 1.0 ±0.2, 1.0± 0.5, 1.6± 1.0, 2.6± 1.9로서 루푸스신염군에서 건강인군(P<0.005)과류마티스관절염군(P<0.01)에 비하여유의하게 증가하였다. 루푸스신염 혈청 20개 중 12개 혈청(60%)에서 면역형광현미경법으로 자가항체에 의한 호중구의 핵 부위 염색이 증가한것으로 관찰되었다. 항 dsDNA 항체 농도, apotosis & necrosisratio 및 IgG MFI ratio 세 측정치에서 세 관계 모두 유의한 상관성이 있었다(P<0.0005). 또한 DNA 추출물로 전항온처리(prein-cubation)하여 IgG MFI ratio와 apoptosis & necrosis ratio 모두 유의하게 감소하였다(N=25, P<0.05).

배경 : 전신성홍반성루푸스(systemic lupus erythematosus, SLE) 환자에서는 혈청 성분에 의해 호중구에 대한 세포자멸사와 괴사가 증가한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 그 성분 중 하나 가 항 dsDNA 항체 등의 자가항체임을 증명하고, 또한 질병 활성 도를 평가하기 위한 임상검사로서 SLE 혈청에서 호중구에 대한 세포독성과 자가항체 결합을 동시에 측정하는 검사법이 유용한지 그 가능성을 조사하였다. 방법 : 루푸스신염(lupus nephritis, LN) 환자 48명, LN이 없 는 SLE 19명, 류마티스관절염(rheumatoid arthritis, RA) 환자 35명 및 건강한 남자 성인 40명으로부터 얻은 총 228개의 혈청을 대상으로 하였다. 시험할 혈청에 건강인의 전혈을 가하여 배양하 였다. 20시간 배양 후 혹은 배양 조건을 변화시켜 호중구에 대한 자가항체 결합과 세포자멸사, 괴사에 대하여 IgG-FITC와 7-aminoactinomycin D를 사용하여 유세포분석법으로 측정하였고, 결과 는 측정치의 시험/건강 대조 비(ratio)로써 나타내었다. 이 결과와 항 dsDNA 항체와의 관계를 조사하였다. 결과 : IgG 평균형광강도(mean fluorescence intensity, MFI) 비(MFI ratio)는 건강인군, RA군, SLE군, LN군에서 각각 1.0± 0.3, 1.6±1.6, 2.0±1.5, 4.8±7.5로서 루푸스신염군에서 건강인군 에 비하여 유의하게 증가하였다(각각 N=20, P<0.05). 네 군에서 세포자멸사와 괴사 비(apoptosis & necrosis ratio)는 각각 1.0± 0.2, 1.0±0.5, 1.6±1.0, 2.6±1.9로서 루푸스신염군에서 건강인군 ( P<0.005)과 류마티스관절염군( P<0.01)에 비하여 유의하게 증가 하였다. 루푸스신염 혈청 20개 중 12개 혈청(60%)에서 면역형광 현미경법으로 자가항체에 의한 호중구의 핵 부위 염색이 증가한 것으로 관찰되었다. 항 dsDNA 항체 농도, apotosis & necrosis ratio 및 IgG MFI ratio 세 측정치에서 세 관계 모두 유의한 상관 성이 있었다( P<0.0005). 또한 DNA 추출물로 전항온처리(preincubation) 하여 IgG MFI ratio와 apoptosis & necrosis ratio 모 두 유의하게 감소하였다(N=25, P<0.05). 결론 : 본 연구에서 SLE 환자의 말초혈액 호중구의 세포자멸 사가 증가함을 확인하였고, 혈청내 항 dsDNA 항체 혹은 다른 항 핵항체가 호중구에 단순히 결합할 뿐만 아니라 능동적으로 호중구 의 자멸사와 괴사를 증가시킴을 알 수 있었다. 이 결과는 자가항 체가 자가항원인 DNA의 노출을 증가시켜 자가면역성을 다시 악 화시키는 발병기전을 추정할 수 있게 한다. 추가 연구가 필요하겠 지만, SLE 혈청의 호중구에 대한 세포독성과 자가항체 결합을 유 세포분석법으로 동시에 측정하는 것은 질병 활성도를 평가하는데 유용한 검사가 될 수 있을 것으로 생각된다.

#Necrosis406 원동일서장수김현숙 #lupus #Anti-dsDNA antibody #Autoantibody #Lupus nephritis #Neutrophil #Apoptosis

참고문헌 (27)

참고문헌 신청

/ 1981 / Polyspecific monoclonal lupus autoantibodies reactive with bothpolynucleotides and phospholipids 153 : 897 ~ 909

/ 1987 / Flow cytometrywith crystal violet to detect intracytoplasmic fluorescence in viablehuman lymphocytes.Demonstration of antibody entering living cells 104 : 195 ~ 200

/ 1989 / Anti-DNA antibodies binddirectly to renal antigens and induce kidney dysfunction in the isolatedperfused rat kidney 142 : 3076 ~ 82

/ 1994 / Anti-nucleosome antibodies complexedto nucleosomal antigens show anti-DNA reactivity and bind to ratglomerular basement membrane in vivo 94 : 568 ~ 77

/ 1996 / Antineutrophil cytoplasmic autoantibodies interact with primarygranule constituents on the surface of apoptotic neutrophils in theabsence of neutrophil priming 184 :

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