다양한 Lactobacillus 균주에 대한 electrotransformation 최적 조건 탐색

이유원; 임성훈; 신춘봉; 소재성

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자료유형: 학술저널

저자정보: 이유원 (인하대학교) 임성훈 (인하대학교) 신춘봉 (인하대학교) 소재성 (인하대학교)

저널정보: 한국생물공학회 KSBB Journal KSBB Journal 제24권 제2호

발행연도: 2009.6

수록면: 182 - 188 (7page)

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Lactobacillus 균주는 대표적인 probiotics로서 인체의 건강유지에 좋은 영향을 준다고 알려져 있다. 본 연구에서는 건강한 한국인 체내에서 분리하고 선별된 6개의 Lactobacillus 균주 (L. paracasei KLB58, L. fermentum MS79 and KLB282, L. plantarum KLB213, L. gasseri KLB238, and L. reuteri KLB270)를 플라스미드 pNCKH104 로 electrotransformation 하였다. 최적 조건을 찾기 위해 pulse voltage, time constant, 세포벽 처리방법, 세포현탁액을 다양하게 변화시켰으며, 그 결과 각각의 균주에 대해 최적의 형질전환 조건을 결정하였다. 대체로 인체에서 분리한 actobacillus 균주는 전처리 없이 0.5 M sucrose buffer 로 현탁하여 1.8 kV의 pulse voltage와 5 ms의 time constant 로 electroporation을 수행하였을 때 약 2.5 × 10³ ∼ 5.5 × 10⁴ CFU/μg DNA의 형질전환 효율을 보였는데, 기존의 Lactobacillus 균주를 이용한 형질전환 실험들에 비해 월등히 높은 결과는 아니지만, Lactobacillus 균속 내의 다양한 종에 적용되는 공통의 조건을 찾음으로써 보다 간편한 형질전환 실험을 기대할 수 있다. 이는 앞으로 산업적, 임상적으로 중요한 Lactobacillus 균주의 형질전환을 손쉽게 하여 항균 펩타이드를 삽입한 벡터의 cell surface display발현 및 분석, 유용유전자 탐색을 위한 knock-out mutant등의 제작에 기여할 수 있으리라 본다.

#Lactobacillus spp. electrotransformation #optimal conditions

참고문헌 (11)

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2. [학술지(정기간행물)] - Bhowmik, T. / 1993 / Development of an electroporation procedure for gene disruption in Lactobacillus helveticus CNRZ 32 / J. Gen. Microbiol. 139 : 1433 ~ 1439

3. [학술지(정기간행물)] - Chassy, B. M. / 1987 / Transformation of Lactobacillus casei by electroporation / FEMS Microbiol. Lett. 44 : 173 ~ 177

4. [학술지(정기간행물)] - Walker, D. C. / 2004 / Electroporation of Lactobacillus acidophilus group A1 / FEMS. Microbiol. Lett. 138 : 233 ~ 237

5. [학술지(정기간행물)] - Berthier, F. / 1996 / Efficient transformation of Lactobacillus sake by electroporation / Microbiology 142 : 1273 ~ 1279

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