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Peroxiredoxin 6 (Prx 6)는 티올-특이적 항산화 단백질에 속하는 효소로서 산화적 스트레스로부터 세포를 보호할 뿐만 아니라 과산화물의 환원작용을 촉매한다. 본 연구에서는 인간 Prx 6의 promoter를 이용하여 항산화반응을 유발하는 추출물을 효과적으로 스크리닝하는 새로운 형질전환마우스를 개발하는 최종목적을 달성하기 위한 중간단계로서, hPrx 6/Luc 벡터를 개발하고, 이들 벡터의 안정적 발현과 성공적 반응성을 세포주를 이용하여 확인하고자 하였다. 이를 위해, 인간 Prx 6 promoter를 증폭하여 luciferase cDNA와 결합한 hPrx 6/Luc 벡터를 제조하였으며, 제조된 벡터를 제한효소 절단과 염기서열분석을 통해 확인하였다. hPrx 6/Luc 벡터는 NCI-H460 세포에 transfection한 후 인삼(KWG), 홍삼(KRG), 맥문동(LP), 홍문동(RLP)의 4가지 추출물을 처리하여 luciferase activity를 측정하였다. 그 결과, luciferase activity는 4가지 추출물에 의해 효과적으로 증가하였고, 특히 KRG과 LP를 처리한 그룹이 KWG과 RLP를 처리한 그룹보다 높았다. 또한, luciferase activity는 RLP 농도에 의존적으로 증가하였다. hPrx 6/Luc 벡터와 hPrx 6 mRNA반응의 차이를 비교하기 위해, 4가지 추출물을 처리한 후 hPrx 6 mRNA의 양을 RT-PCR로 분석하였다. 그러나, hPrx 6 mRNA의 양은 비록 고농도의 RLP 추출물에서는 약간의 증가가 관찰되었지만, 대조군에 비하여 4가지 추출물에서 유의적인 차이가 없었다. 한편, 4가지 추출물에 의한 superoxide dismutase (SOD) 활성의 변화는 비록 일부 차이는 있었지만 hPrx 6/Luc 벡터와 유사한 반응을 나타내었다. 따라서, 이러한 결과는 hPrx 6/Luc 벡터는 성공적으로 제조되었고, 세포내에서 안정적으로 발현하면서 항상화물질에 민감하고 정량적으로 반응할 수 있음을 제시하고 있다. 더불어, 이러한 세포주에서 확인결과를 바탕으로 형질전환마우스가 개발된다면, 항산화물질을 정량적으로 스크리닝하는 시스템으로 적용가능성이 매우 높음을 보여주고 있다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
References
초록
참고문헌 (38)
참고문헌 신청
2. [학술지(정기간행물)] - Borgstahl, G. E. / 1996 / Human mitochondrial manganese superoxide dismutase polymorphic variant Ile58Thr reduces activity by destabilizing the tetrameric interface / Biochemistry 35 : 4287 ~ 4297
3. [학술지(정기간행물)] - Chae, H. Z. / 1999 / Isoforms of mammalian peroxiredoxin that reduce peroxides in presence of thioredoxin / Methods Enzymol 300 : 219 ~ 226
4. [학술지(정기간행물)] - Chen, X. C. / 2005 / Ginsenoside Rg1 reduces MPTP-induced substantia nigra neuron loss by suppressing oxidative stress / Acta Pharmacol Sin 26 : 56 ~ 62
5. [학술지(정기간행물)] - 최선일 / 2011 / Effects of Steaming Time and Frequency for Manufactured Red Liriope platyphylla on the Insulin Secretion Ability and Insulin Receptor Signaling Pathway / Laboratory Animal Research 27 (2) : 117 ~ 126
6. [학술지(정기간행물)] - Deng, H. L. / 1991 / Anti-lipid peroxilative effect of ginsenoside Rb1 and Rg1 / Chin Med J (Engl) 104 : 395 ~ 398
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4. [학술지(정기간행물)] - Chen, X. C. / 2005 / Ginsenoside Rg1 reduces MPTP-induced substantia nigra neuron loss by suppressing oxidative stress / Acta Pharmacol Sin 26 : 56 ~ 62
5. [학술지(정기간행물)] - 최선일 / 2011 / Effects of Steaming Time and Frequency for Manufactured Red Liriope platyphylla on the Insulin Secretion Ability and Insulin Receptor Signaling Pathway / Laboratory Animal Research 27 (2) : 117 ~ 126
6. [학술지(정기간행물)] - Deng, H. L. / 1991 / Anti-lipid peroxilative effect of ginsenoside Rb1 and Rg1 / Chin Med J (Engl) 104 : 395 ~ 398
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