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아스코크로린(Ascochlorin, ASC)은 Ascochyta viciae로부터 추출된 프레닐페놀 물질로, 혈청 콜레스테롤과 트리글리세라이드 수치를 감소시키고 종양 성장을 억제한다는 연구 결과가 보고되어 있다. 본 논문에서는 아스코크로린이 생리학적 혹은 병리학적인 작용과 염증반응에서 약리학적으로 유도되는 반응을 어떻게 조절하며, 이러한 메커니즘에 대해 이해하기 위해 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린을 처리하여 이에 대한 프로테옴의 특이적인 발현에 대해 분석하였다. 따라서 본 연구는 LPS를 처리한 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린을 처리하여 염증과정에 관련된 단백질의 발현 양상을 확인하기 위해 프로테오믹스를 시행하였다.
Mouse macrophage RAW264.7 세포에 아스코크로린을 처리한 조건과 무처리한 조건으로 나누어 two-dimensional electrophoresis (2-D SDS-PAGE), matrix-assisted laser de-sorption/ionization mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) 와 bioinformatics 방법으로 아스코크로린을 처리한 mouse macrophage Raw264.6 세포의 프로테옴을 분석하였다. 그 결과 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린 처리 시 Calreticulin이 4배 감소, β-actin도 4배 감소 그리고 vimentin이 1.5배 감소함을 확인 할 수 있었다. 그러나 rabaptin 아스코크로린 처리에 의해 3배 증가함을 확인 할 수 있었다. 이러한 단백질 발현은 RT-PCR을 수행하여 결과에 대해 재확인 하였으며, 프로테오믹스와 동일한 결과를 얻을 수 있었다.
따라서 본 연구를 통해 LPS 처리에 의해 활성화된 mouse macrophage RAW264.7 세포에 ASC를 처리한 후 이차원 전기영동법을 이용하여, 단백질의 발현 변화 및 양상을 규명하고 단백질 지도를 확립 하였으며, RAW264.7 세포를 이용한 면역세포 모델에서 ASC의 항염증 작용을 중심으로 생리활성 조절기능을 확인 할 수 있었다. 향후 분자 기능 조절 연구와 전 임상 연구를 통해 ASC의 생리활성 조절 기능을 규명한다면 ASC는 항염증 및 항암활성을 갖는 약물로 개발될 것으로 기대된다.
Mouse macrophage RAW264.7 세포에 아스코크로린을 처리한 조건과 무처리한 조건으로 나누어 two-dimensional electrophoresis (2-D SDS-PAGE), matrix-assisted laser de-sorption/ionization mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) 와 bioinformatics 방법으로 아스코크로린을 처리한 mouse macrophage Raw264.6 세포의 프로테옴을 분석하였다. 그 결과 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린 처리 시 Calreticulin이 4배 감소, β-actin도 4배 감소 그리고 vimentin이 1.5배 감소함을 확인 할 수 있었다. 그러나 rabaptin 아스코크로린 처리에 의해 3배 증가함을 확인 할 수 있었다. 이러한 단백질 발현은 RT-PCR을 수행하여 결과에 대해 재확인 하였으며, 프로테오믹스와 동일한 결과를 얻을 수 있었다.
따라서 본 연구를 통해 LPS 처리에 의해 활성화된 mouse macrophage RAW264.7 세포에 ASC를 처리한 후 이차원 전기영동법을 이용하여, 단백질의 발현 변화 및 양상을 규명하고 단백질 지도를 확립 하였으며, RAW264.7 세포를 이용한 면역세포 모델에서 ASC의 항염증 작용을 중심으로 생리활성 조절기능을 확인 할 수 있었다. 향후 분자 기능 조절 연구와 전 임상 연구를 통해 ASC의 생리활성 조절 기능을 규명한다면 ASC는 항염증 및 항암활성을 갖는 약물로 개발될 것으로 기대된다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
결과 및 고찰
요약
감사의 글
References
참고문헌 (52)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Adams, D. O / 1984 / The cell biology of macrophage activation / Annu. Rev. Immunol 2 : 283 ~ 318
2. [학술지(정기간행물)] - Adkins, J. N. / 2002 / Toward a human blood serum proteome: Analysis by multidimensional separation coupled with mass spectrometry / Molecular & Celluar Proteomics 1 : 947 ~ 955
3. [학술지(정기간행물)] - Al-Sindi, K. / 2007 / Inflammatory myofibroblastic tumor of paranasal sinuses / Saud. Med. J 28 : 623 ~ 627
4. [학술지(정기간행물)] - Ando, M. / 1984 / Multiple regression analysis of the cholinesterase activity with certain physiochemical factors / Environ. Res 33 : 96 ~ 105
5. [학술지(정기간행물)] - Basu, S / 1999 / Calreticulin, a peptide-binding chaperone of the endoplasmic reticulum, elicits tumor and peptide specific immunity / J. Exp. Med 189 : 797 ~ 802
2. [학술지(정기간행물)] - Adkins, J. N. / 2002 / Toward a human blood serum proteome: Analysis by multidimensional separation coupled with mass spectrometry / Molecular & Celluar Proteomics 1 : 947 ~ 955
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5. [학술지(정기간행물)] - Basu, S / 1999 / Calreticulin, a peptide-binding chaperone of the endoplasmic reticulum, elicits tumor and peptide specific immunity / J. Exp. Med 189 : 797 ~ 802
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