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담즙산과 합성담즙산유도체가 여러 종류의 암세포에 세포자멸사(apoptosis)를 유도하며, 항암효과가 있다고 알려져 있다. 또한 합성 chenodeoxycholic acid (CDCA) 유도체가 여러 가지 암세포에 유도한 세포자멸사 연구들이 보고되어 왔다. 하지만 아직까지 사람흑색종세포에 합성 CDCA 유도체가 유도한 세포자멸사 연구는 보고되지 않았다. 그래서 본 연구는 합성 CDCA 유도체인 HS-1199와 HS-1200이 사람흑색종세포(G361 세포)에 세포자멸사 효과와 세포자멸사 기작을 밝혀내기 위해서 수행되었다.
합성 CDCA에 처리된 G361 세포의 생존율을 확인하기 위해서 MTT 방법을 사용하였고, 세포자멸사 유도 검증은 DNA 전기영동법과 Hoechst 염색을 이용하였다. 세포자멸사에 관계하는 단백질의 발현 변화와 세포 내에서 이동을 밝혀내기 위해서 Western bot 분석과 면역형광염색법을 수행하였다. 더 나아가서 proteasome 활성도와 사립체막 전위 변화를 측정하였다.
합성 CDCA 유도체로 처리된 G361 세포에서 caspase-3, DFF, PARP의 파괴, caspase-3 (HS-1200 only), PARP, DFF의 분절화, DNA 조각남(HS-1200 only), 핵 응축, proteasome 활성화의 감소, 사립체막전위(MMP)의 감소, 그리고 cytochrome c와 AIF의 사립체에서 세포질로의 유리와 같은 다양한 세포자멸사의 증거를 보였다. 두 개의 합성 CDCA 유도체 중에서 HS-1200이 HS-1199보다 더욱 강한 세포자멸사 효과를 보였다.
본 연구는 CDCA 유도체인 HS-1200이 사람흑색종세포에서 proteasome, 사립체 그리고 caspase 경로을 통해서 세포자멸사를 유도하는 것을 증명하였다. 이러한 결과는 HS-1200이 사람흑색종의 새로운 치료적 전략으로 응용될 수 있다고 생각한다.

목차

Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
References
간추림

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UCI(KEPA) : I410-ECN-0101-2009-511-016246558