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Collagenases are generally defined as enzymes that are capable of degrading the polypeptide backbone of native collagen under conditions that do not denature the protein. An extracellular collagenase-producing bacterial strain was isolated from kimchi and identified to be Bacillus subtilis JS-17 through morphological, cultural, biochemical characteristics and 16S rDNA sequence analysis. Optimum culture condition of Bacillus subtilis JS-17 for the production of collagenase was 1.5% fructose, 1% yeast extract, 0.5% K₂HPO₄, 0.4% KH₂PO₄, 0.01% MgSO₄ㆍ7H₂O, 0.01% MnSO₄ㆍ4H₂O, 0.1% citrate and 0.1% CaCl₂. The production of collagenase was optimal at 30℃ for 72 hr. A collagenase was isolated from the culture filtrate of Bacillus subtilis JS-17. The enzyme was purified using Amberlite IRA-900 column chromatography, Sephacryl S-300 HR column chromatography and DEAE-Sephadex A-50 column chromatography. The purified collagenase has an specific activity 192.1 units/㎎. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 28 kDa by SDS-PAGE. The purified collagenase has 100% activity up to 55℃.
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Abstract
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참고문헌
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Asdornnithee, S., K. Akiyama, T. Sasaki, and R. Takata. 1994. Isolation and characterization of a collagenolytic enzyme from Bacillus licheniformis N22. J. Ferment. Bioeng. 78, 283-287.
Bond, M. D. and H. E. Van Wart. 1984. Characterization of the individual collagenase from Clostridium histolyticum. Biochemistry. 23, 3085-3091.
Bond, M. D. and H. E. Van Wart. 1984. Purification and separation of individual collagenase of Clostridium histolyticum using red dye ligand chromatography. Biochemistry 23, 3077-3085.
Bradford, M. M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72, 248-254.
Denis, L. J. and J. Verweij. 1997. Matrix metalloproteinase inhibitors : Present achievements and future prospects. Investigational New Drugs 15, 175-185.
Bond, M. D. and H. E. Van Wart. 1984. Characterization of the individual collagenase from Clostridium histolyticum. Biochemistry. 23, 3085-3091.
Bond, M. D. and H. E. Van Wart. 1984. Purification and separation of individual collagenase of Clostridium histolyticum using red dye ligand chromatography. Biochemistry 23, 3077-3085.
Bradford, M. M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72, 248-254.
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