C57BL/6N 생쥐와 hairless 생쥐에서 털의 성장주기별 피부내 비만세포 수의 변화 및 neuropeptide들의 면역조직화학적 변화를 관찰하고 성장주기별로 일어나는 B림프구, T림프구 및 T림프구의 아형에 관한 면역반응을 관찰함으로써 성장주기별로 일어나는 변화와 탈모와 관련된 인자들을 관찰하고자 하였다.
C57BL/6N 생쥐에서 피부내 비만세포의 수는 출생후 1일째부터 35일째까지는 점차 감소하는 경향을 보였으나 21일째의 탈모가 일어난 부위의 피부에서는 증가하였다. Substance P, CGRP, CRF, CRF-receptor 그리고 CRF-binding protein에 대한 면역조직화학 염색강도는 1, 3, 8일째에는 대체적으로 미약하였으나 35일째에는 매우 강하게 염색되었다. 또한 21일째의 탈모 된 생쥐와 29일째 탈모가 일어난 후 새로 발모중인 생쥐를 비교한 바 21일째의 탈모된 생쥐에서 강하게 염색되었다. 비장내 B/T림프구의 분포는 생후 3일째부터 35일째까지는 증가하는 경향을 보였으나 생후 21째의 탈모군 (no pigment)에서는 감소하는 경향을 보였다. 또한 비장의 T림프구 중의 CD4/CD8 양성세포의 비율은 생후 3일째, 8일째, 35일째로 성장하면서 CD4/CD8 양성세포의 비율이 증가하는 경향을 보였으며, 생후 21일째의 탈모군 (휴지기의 피부, no pigment)에서는 29일째의 탈모군 (성장기의 피부, pigment)에 비하여 특히 CD4 양성세포인 Th 림프구가 현저하게 감소하였다.
Hairless 생쥐에서 피부내 비만세포의 수는 출생후 3일째부터 7일째까지는 큰 변화가 없었으나 13일째부터 21일째까지 비만세포의 수가 현저히 증가하는 경향이었으며 56일째의 생쥐 피부의 비만세포는 탈과립된 비만세포를 많이 관찰할 수 있었다. Substance P, CGRP, CRF에 대한 면역조직화학 염색 강도는 발모가 일어나는 3, 7, 13일째에는 미약하였으나 탈모가 일어나기 시작하는 17일째부터 완전탈모가 일어난 21일째에서 56일째로 성장하면서 매우 강하게 염색되었다. 비장내 B/T림프구의 분포는 생후 13일째에 B/T림프구 모두 최대치를 보였다가 탈모가 시작되는 그 후부터 시간이 경과함에 따라 점차로 감소하였다. 또한 비장의 T림프구 중의 CD4/CD8 양성세포의 비율도 역시 생후 13일째(발모시기)에 최대치를 나타내었다.
이상의 실험결과로 탈모 및 발모와 관련된 인자들은 비만세포 수의 변화, neuropeptide (substance P, CGRP, CRF)의 면역염색 강도 및 면역반응과 복합적인 관계가 있을 것으로 사료된다.
We have examined the factors related to hair growth regulation during postnatal growth periods in C57BL/6N, hairless and alopecia areata mice model. We first studied the number, localization and granulation status of skin mast cells during postnatal growth periods by toluidine blue, alcian blue and H&E staining methods. We second studied immunoreactive density of neuropeptide (substance P, CGRP, CRF, CRF-receptor, CRF-binding protein) in skin by immunohistochemical methods. We third studied changes of subpopulation of splenocytes and thymocytes during postnatal growth periods in C57BL/6N, hairless and alopecia areata mice model by flow cytometry.
The results were as follows : In C57BL/6N mice, the number of mast cells was decreased from 1day to 35 day during postnatal growth period. But skin of alopecia areata model mice in 21 day, the number of mast cells was more increased than that of normal skin. Immunoreactive density of neuropeptide (Substance P, CGRP, CRF, CRF-receptor, CRF-binding Protein) in skin during postnatal growth periods in C57BL/6N mice was weakly stained in 1, 3, 8 day, but immunoreactive density of neuropeptide was heavily stained in 35day and 21 day (no pigment). Splenic B and T lymphocytes were gradually increased with growth, and significantly increased in 29 days-old (hairless, pigment group) than 21 days-old (hairless, no pigment group) C57BL/6N mice. Especially, CD4 positive Th cells in splenic T lymphocytes were markedly increased. But thymic T lymphocytes were not shown any differences.
In hairless mice, the number of mast cells was not changed from 3 day to 7 day, but more increased from 13day to 21day. Immunoreactive density of neuropeptide (substance P, CGRP, CRF) in skin during postnatal growth periods in hairless mice was weakly stained in 3, 7 and 13 day. but immunoreactive density of neuropeptide was heavily stained from 17 to 56 day. Splenic B and T lymphocytes were most highly increased in 13 days-old genetically hairless mice.
And CD4 positive Th cells and CD8 positive Tc cells in splenic T lymphocytes were significantly increased. And also thymic Th lymphocytes were increased in 13 days-old and 17 days-old hairless mice.
These experiment suggest that the factors related to hair loss were mast cells, immunoreactive density of neuropeptide (substance P, CGRP, CRF) and immune response during postnatal growth periods in C57BL/6N, hairless and alopecia areata mice model.