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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 원무호
- 발행연도
- 2022
- 저작권
- 강원대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수6
이 논문의 연구 히스토리 (4)
2022
Increased calbindin D28k expression via long-term alternate-day fasting does not protect against ischemia-reperfusion injury: a focus on delayed neuronal death, gliosis and immunoglobulin G leakage
Hyejin Sim
의학과
2022.01
학위논문
Therapeutic effects of stiripentol against ischemia-reperfusion injury in gerbils: a focus on cognitive deficit, neuronal death, astrocyte damage and BBB leakage in the hippocampus
Hyejin Sim
,
Ji Hyeon Ahn
,
Jae-Chul Lee
외 7명
한국실험동물학회 학술발표대회 논문집
2022.01
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Calbindin-D28k(CB)은 칼슘-결합 단백질로서 다양한 신경 기능을 중재하는 것으로 알려져 있으며, 특히 허혈-재관류 손상으로부터 신경 흥분독성(excitotoxicity)을 억제함으로써 신경보호에 기여하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 성체 저빌을 이용하여 각각 일반 식이(normal diet, ND) 또는 간헐적 단식(intermittent fasting, IF)을 3개월 동안 수행하였으며, 무작위로 허위 수술 군(sham-operated group)과 허혈 수술 군(ischemia-operated group)으로 배정하였다. 허혈 손상은 5분간의 일시적인 전뇌 허혈(transient forebrain ischemia)에 의해 유도되었으며, 단기 기억은 수동 회피 실험(passive avoidance test)을 통해 확인되었다. 3개월간의 일반 식이 또는 간헐적 단식 후, CB의 발현 양상은 웨스턴 블럿 분석과 면역조직화학염색을 통해 확인되었으며, 조직학적 분석을 통하여 뇌허혈에 따른 해마 Cornu Ammonis 1 (CA1) 영역에서 신경 보호 효과와 반응성 신경 아교증을 확인하였다. 뇌허혈 유발에 따른 단기 기억 능력은 일반 식이를 실시한 저빌과 간헐적 단식을 실시한 저빌 사이의 유의미한 차이가 없는 것으로 확인되었다. 또한, 허위 수술 군에서 간헐적 단식을 수행한 저빌은 일반 식이를 수행한 저빌에 비하여 CA1영역의 피라미드 신경세포에서 CB발현량이 유의미하게 증가된 것을 관찰하였다. 그러나, 허혈 수술 군에서는 간헐적 단식을 수행한 저빌은 일반 식이를 수행한 저빌과 유사하게 뇌허혈 후, 해마 CA1영역의 피라미드 신경세포에서 CB의 발현이 감소하는 것으로 확인되었다. 일반 식이 및 간헐적 단식을 수행한 결과, 뇌허혈 유발에 따른 해마 CA1영역의 피라미드 신경세포 사멸을 관찰하였다. 또한, 뇌허혈 유발 후 시간이 지남에 따라 해마 CA1영역에서 별아교세포(astrocyte)와 미세아교세포(microglia)의 반응성 신경 아교증이 유발되는 것을 관찰하였다. 더 나아가, 일반 식이 및 간헐적 단식을 수행한 저빌에서, 면역글로블린 G (immunoglobulin G, IgG)는 뇌허혈 유발에 따라 혈관으로부터 CA1실질로 누출되는 것을 관찰하였으며, IgG의 누출 정도는 시간이 흐름에 따라 점진적으로 증가하는 것으로 확인되었다. 본 연구에서는 3개월 동안 간헐적 단식을 수행한 결과 해마 CA1영역의 피라미드 신경세포에서 CB발현이 증가되는 것을 확인하였다. 그러나 간헐적 단식을 수행한 결과 허혈 손상으로부터 해마의 CA1 피라미드 신경세포를 보호하지 못한 것으로 관찰되었다. 이는 간헐적 단식을 수행함에 따라 CB발현량이 유의미하게 증가하였음에도 불구하고, 근본적으로 뇌허혈에 따른 혈액-뇌 장벽(blood-brain barrier, BBB) 누수를 방지하지 못하였기 때문에 지연성 신경세포 사멸이 유발되었으며, 더 나아가 반응성 신경아교증을 촉구하게 된 것으로 확인되었다.
목차
I. Introduction １II. Materials and Methods ４1. Experimental animals ４2. IF and Experimental Groups ５3. Induction of Transient Forebrain Ischemia ６4. Passive avoidance test (PAT) ７5. Western Blotting ８6. Preparation Histological Sections １０7. Immunohistochemistry １１8. Cresyl violet (CV) Histochemistry １２9. Fluoro-Jade B (FJB) Histofluorescence Staining １３10. Data Analysis １４11. Statistical Analysis １６III. Results １９1. PAT １９2. CB Protein Levels ２２3. CB Immunoreactivity ２５4. Neuroprotection ２８1) CV Positive Cells ２８2) NeuN Immunoreactive Neurons ３１3) FJB-Positive Cells ３２5. Microgliosis ３５6. Astrogliosis ３９7. Immunoglobulin G (IgG) Immunoreactivity ４３IV. Discussion ４６V. References ５３
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