더덕 에탄올 추출물을 처리한 폐세포의 미세먼지에 의해 유도된 산화스트레스 발생 억제 효과 :Protective effect of ethanol extract of Codonopsis Lanceolata against oxidative stress induced by urban particulate matter on alveolar epithelial cell

소희정

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자료유형: 학위논문

저자정보: 소희정 (고려대학교, 고려대학교 생명환경과학대학원)

지도교수: 이광원

발행연도: 2020

저작권: 고려대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2021

더덕 에탄올 추출물의 도시미세먼지 노출로 인한 폐 세포 산화스트레스 발생과 세포밀착연접 손상 억제 효과

소희정 , 전수현 , 이진원 외 1명 한국식품과학회지 2021.04 학술저널

2020

더덕 에탄올 추출물을 처리한 폐세포의 미세먼지에 의해 유도된 산화스트레스 발생 억제 효과

소희정 식품공학과 2020.01 학위논문

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미세먼지는 흡인성 먼지로 대기오염물질을 일으키는 주요 원인이며 중금속, 먼지입자, 산 등이 대기 중에 분산되어 있다. UPM은 호흡기에 침투 시 폐 질환이나 호흡기 감염 및 세포의 염증과 노화를 발생시킨다. 더덕은 동양에서 전통적으로 천식이나 기관지염에 대한 민간요법으로서 사용되어 왔으나 더덕과 같은 약초와 미세먼지의 직접적인 관련을 연구는 부족한 실정이다.
따라서 본 연구는 인간 폐세포에 미세먼지(UPM, Urban particulate matter)에 의해 유도된 산화스트레스에 대한 더덕 에탄올 추출물(ECL, Ethanol extract of Codonopsis lanceolata)의 보호 효과를 확인하고자 하였다. 본 실험에는 동결건조한 더덕 원물을 60℃ 55% 주정에탄올에 5시간 추출하여 농축 후 동결건조하였다. ECL은 건조물로 냉장보관하였고 ECL과 UPM은 사용 직전에 희석하여 사용하였다.
총 폴리페놀 함량(13.29 ± 0.5 mg GAE/g DM), DPPH radical 소거능(17.41 ± 0.34 mg DM/mL), FRAP(28.50 ± 0.32 μmol FeSO4?7H2O/g DM) assay를 이용하여 항산화 활성을 측정하였다. UPM의 처리로 인하여 ROS는 유의적으로 증가하였으며 tight junction marker인 N-Cadherin, Fibronectin, occludin, ZO-1 및 Claudin-4 및 의 mRNA 발현 수치를 낮추었다. UPM에 노출되기 전 ECL를 처리한 경우 ROS의 생성을 농도의존적으로 억제한다는 것을 보여주었고 UPM에 의한 tight junction level의 감소를 완화시키는 경향을 보였다. N-Cadherin, Fibronectin, occludin은 ECL의 농도가 높아질수록 효과를 보였고 ZO-1, Claudin-4의 수치는 낮은 농도의 ECL에서 효과를 보였다.
더덕은 호흡기로 유입된 미세먼지에 대해 손상 보호효과를 보임으로서 관련 질병의 예방과 폐 건강에 기능성을 가진 천연물로 이용 가능할 것으로 기대된다.

#Codonopsis Lanceolata #UPM #Urban particulate matter #reactive oxygen species #더덕

I. 서 론 1
II. 연구사 3
2.1. 미세먼지의 정의 및 위험성 3
2.1.1. 미세먼지의 정의 및 분류 3
2.1.2. 미세먼지의 발생 및 대응 현황 3
2.1.3. 미세먼지의 위험성 5
2.2. 더덕의 특성 및 연구 동향 7
2.2.1. 더덕의 특성 7
2.2.2. 더덕의 효능 및 연구 동향 7
III. 재료 및 방법 9
3.1. 더덕 에탄올 추출물(ECL)의 제조 9
3.2. 총 폴리페놀 함량 측정 11
3.3. DPPH radical 소거활성 측정 11
3.4. FRAP(Ferric ion reducing antioxidant power) 측정 12
3.5. 세포 배양 13
3.6. UPM 표준물질의 제조 14
3.7. 세포 생존율(Cell viability) 분석 15
3.8. 세포 내 반응성 산소종(ROS) 검출 16
3.9. RNA 분리 및 Real-time PCR 17
3.10. 통계처리 19
IV. 결과 및 고찰 20
4.1. 더덕 에탄올 추출물 제조 단계 별 수율 20
4.2. 더덕 에탄올 추출물의 항산화 활성 22
4.2.1. 총 폴리페놀 함량 22
4.2.2. DPPH radical 소거활성 24
4.2.3. FRAP 26
4.3. 더덕 에탄올 추출물의 폐세포 독성 28
4.4. 미세먼지의 폐세포 독성 30
4.5. 더덕 에탄올 추출물 전처리 후 미세먼지 처리 시 폐세포 독성 32
4.6. 미세먼지에 의해 유도된 산화 스트레스에 대한 더덕 에탄올 추출물의 폐세포 보호 효과 34
4.7. mRNA와 단백질 수준에서 Tight junction 회복 효과 37
V. 요 약 42
VI. 인용문헌 44

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