Treatment of 6-shogaol combined with hyperthermia synergistically induced apoptosis in U937 cell line :U937 세포에서 6-shogaol과 온열 병행치료가 세포사멸 유도에 미치는 효과

안채령

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자료유형: 학위논문

저자정보: 안채령 (우석대학교, 우석대학교 대학원)

지도교수: 오찬호

발행연도: 2020

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2020

Treatment of 6-shogaol combined with hyperthermia synergistically induced apoptosis in U937 cell line

안채령 식품생명공학과 2020.01 학위논문

2019

Treatment of Cinnamomi Cortex combined with hyperthermia synergistically suppressed proliferation and induced apoptosis in U937 cell line.

안채령 , 박선향 , 김홍준 외 2명 대한한의학방제학회지 2019.01 학술저널

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림프종은 림프구에서 발생하는 혈액암 집단으로, 2019년 미국에서
거의 20,000명이 사망한 것으로 추정된다. 온열은 암세포의
apoptosis를 유도할 수 있는 잠재적인 접근법이다. 6-shogaol은 림프
종을 포함한 항암 효과가 있는 것으로 보고되었지만 6-shogaol과 온
열의 병행 치료는 입증되지 않았다. 우리는 이 연구에서 인간 림프
종 U937 세포주에서 apoptosis에 대하여 6-shogaol과 온열 병행 치
료의 시너지 효과를 평가하였다. 6-shogaol 및 온열 병행 치료로
U937 세포에서 세포사멸이 유발되었는데, 이는 apoptotic 조절 인자
인 Cleaved Caspase-3, Caspase-9, Bcl-2 및 Bcl-xL과 Cyclin D1,
VEGF, MMP-2 와 MMP-9을 포함한 전이 인자에 의해 조절되었다.
또한, MAPK 및 AKT는 병행 처리에 의해 인산화되는 반면, HSP70
및 survivin은 억제되었으며 특히, 42℃ 온열 결합 U937 세포에서
극적으로 억제되었다. 추가로 flow cytometry 분석법은 6-shogaol
및 온열 병행 치료가 U937 세포에서 세포주기 정지 유도를 밝혔다.
활성 산소는 세포 운명에 결정적인 역할을 하기 때문에, 우리는
6-shogaol과 온열 병행 치료가 ROS 수준에 영향을 미치는지 조사하
였다. 결과적으로, 병행 처리된 U937 세포에서 매우 증가 된 ROS
신호가 관찰되었다. 게다가, ROS 억제제인 NAC 전처리에 의해
6-shogaol과 온열 병행치료는 apoptosis를 유도하지 않았다. 결론적
으로, 본 연구의 결과는 림프종 치료에 대한 효과적인 접근법으로서
6-shogaol과 온열 병행 치료의 가능성을 제시한다.

Ⅰ. Introduction 5
Ⅱ. Materials and Methods 8
1. Materials 8
(1) Reagents 8
(2) Cell line 8
(3) Hyperthermia 8
2. Methods 9
(1) MTT assay 9
(2) Trypan blue assay 9
(3) Western blot analysis 10
(4) Apoptosis assay 11
(5) MitoPotential analysis 11
(6) Cell cycle analysis 12
(7) Reactive oxygen species (ROS) analysis 12
(8) Statistical analysis 12
Ⅲ. Results 13
1. Combination of 6-shogaol and hyperthermia of 42℃ synergistically inhibits cell proliferation of U937 cells 14
2. Combination of 6-shogaol and hyperthermia of 42℃ increases expression of apoptosis associated proteins in U937 cells 16
3. Combination of 6-shogaol and hyperthermia induces apoptosis by arresting cell cycle in U937 cells 20
4. Combination of 6-shogaol and hyperthermia increases ROS signaling in U937 cells 21
5. Apoptotic effect of combination of 6-shogaol and hyperthermia in U937 cells is dependent on ROS signaling 23
Ⅳ. Discussion 24
Ⅴ. Conclusion 30
Ⅵ. References 31

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