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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

엄지영 (창원대학교, 昌原大學校)

지도교수
趙鏞權
발행연도
2019
저작권
창원대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수21

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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In order to develop a natural antidandruff agent, the antifungal effects of Cinnamomum cassia Blume 80% ethanol extract were evaluated against five Malassezia strains (M. restricta, M. globosa, M. furfur, M. slooffiae, M. sympodialis). The active compound was isolated and its structure was identified in this study. Cinnamon was selected as antifungal substances from the 54 plant extracts. The antifungal activity of crude extract and hexane fraction (CHF) was evaluated using a paper disc diffusion method at a concentration of 1.5 mg/disc. Their activity showed higher than Zinc pyrithione (ZPT) in M. furfur and M. slooffiae and lower than ZPT in M. restricta, M. globosa and M. sympodialis, but all five strains showed inhibitory activity. Thus, CHF was separated and purified by silica gel column chromatography, Prep-HPLC and analytic HPLC, and the structure was analyzed by NMR. It was identified as coumarin. Coumarin showed the antifungal activity in M. furfur, M. slooffiae, and M. sympodialis. In the susceptibility test, MIC50 values of coumarin were 176.9 μM, 624.0 μM and 157.6 μM, respectively, the activity was confirmed to be lower than that of Zinc pyrithione. The anti-inflammatory activity of coumarin at a concentration of 0.013~0.855 nM showed that inhibition of 18~22% of nitric oxide product in RAW 264.7 cell.

목차

Ⅰ. 서론 1
1. 연구의 배경 1
2. 계피 4
3. 연구목적 6
Ⅱ. 실험재료 및 방법 7
1. 실험재료 7
1) 시료 7
2) 균주, 세포주 및 배지 8
3) 시약 및 기기 9
2. 실험방법 10
1) Screening 10
2) 시료 추출 및 분리 10
(1) 추출 10
(2) 분리 및 정제 11
① Solvent extraction 11
② TLC (Thin layer chromatography) 11
③ Silica gel column chromatography 11
④ HPLC (High performance liquid chromatography) 12
3) 항균활성 측정 13
(1) 균 배양 및 배지 13
(2) Paper disc diffusion method 13
(3) Malassezia spp.에 대한 감수성 검사 14
4) 항염증 활성 측정 15
(1) 세포배양 . 15
(2) MTT assay 를 이용한 세포독성 측정 15
(3) LPS 처리에 따른 세포독성 측정 16
(4) Nitric oxide 생성 저해 16
5) NMR 을 이용한 구조 분석 17
6) 통계처리 17
Ⅲ. 실험결과 18
1. Screening 18
2. 시료의 추출, 분리 및 정제 21
1) 시료의 추출 수율 21
2) TLC (Thin layer chromatography) 21
3) Silica gel column chromatography 21
4) Prep-HPLC (High performance liquid chromatography) 24
5) Analytic HPLC 26
3. 항균활성 27
1) Paper disc 27
(1) Crude extract 27
(2) Solvent fractions 29
(3) Silica gel column chromatography fractions 31
(4) HPLC fractions 35
4. NMR 을 통한 구조분석 . 37
5. Coumarin 활성 시험 39
1) 시료의 농도별 Inhibitor zone 측정 39
2) Malassezia 에 대한 감수성 측정 41
3) 항염활성. 45
(1) 세포생존율 측정 46
(2) LPS 를 처리한 세포의 세포독성 측정 47
(3) NO 생성 저해 효과 . 48
Ⅳ. 결론 및 고찰 49
참고문헌 52
Abstract 57

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