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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

송현지 (계명대학교, 계명대학교 대학원)

지도교수
이승욱
발행연도
2019
저작권
계명대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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본 연구에서는 염증유발물질에 의해 유도된 RAW264.7 세포를 이용하여 벨루가 렌틸 추출물(beluga lentil extract, BLE)의 항염증 활성을 확인한 후, 이와 관련된 기전을 규명하였다. 벨루가 렌틸 추출물의 최고 농도인 0.6 mg/mL에서 우수한 nitric oxide (NO) 저해 효과를 나타냈으며, NO 생성에 직접적으로 관여하는 inducible NO synthase (iNOS)의 단백질 및 mRNA 발현을 확인한 결과, BLE의 처리농도에 따라 LPS 대조군에 비해 iNOS의 단백질 및 mRNA 발현이 유의적으로 감소하였다. 이러한 염증매개물질의 발현을 조절하는 NF-κB/MAPK 신호전달 경로에 미치는 영향을 확인해 본 결과, 단백질 발현량 모두 감소되지 않음을 보아 NF-κB/MAPK pathways와는 연관성이 없는 것으로 확인되었다. 한편, BLE가 Nrf2/HO-1 경로에 미치는 영향을 확인한 결과, BLE는 LPS로 유도된 염증반응에서 Nrf2의 활성화를 통해 HO-1 발현을 증가시킴으로써 LPS에 의한 염증성 사이토카인으로부터 보호 활성을 나타낸다는 사실을 확인하였다. 이 결과들을 종합해 볼 때, LPS에 의해 유도된 RAW264.7 세포에서 BLE의 iNOS 발현 억제 효과는 Nrf2/HO-1 활성화를 통해 조절됨을 알 수 있었다. 따라서 BLE는 천연물 유래의 잠재적인 항염증 소재로서 가능성을 확인하였으며, 향후 동물실험을 통해 항염증 효과를 입증하기 위한 추가적인 연구가 필요할 것으로 판단된다.

목차

1. 서론 1
2. 재료 및 방법 4
2.1. 시약 4
2.2. 기기 5
2.3. 시료준비 5
2.4. 세포배양 6
2.5. RAW264.7 세포와 3T3-L1 지방세포의 공동배양 6
2.6. 세포 생존율 측정 7
2.7. Nitric oxide (NO) 생성량 측정 7
2.8. Western blot법에 의한 단백질 발현 분석 8
2.9. Quantitative real-time PCR을 이용한 mRNA 발현 분석 9
2.10. 면역형광염색 측정 11
2.11. 통계처리 11
3. 결과 및 고찰 12
3.1. 벨루가 렌틸 추출물(BLE)이 염증반응에 미치는 영향 12
3.1.1. BLE가 lipopolysaccharide (LPS)에 의해 유도된 NO 생성 및 세포 생존율에 미치는 영향 12
3.1.2 BLE가 lipoteichoic acid (LTA) 및 3T3-L1 지방세포 공동배양에 의해 유도된 NO 생성 및 세포 생존율에 미치는 영향 14
3.1.3. BLE가 항염증 관련 유전자 발현에 미치는 영향 16
3.1.4. BLE가 iNOS 단백질 및 mRNA 발현에 미치는 영향 18
3.1.5. BLE가 LTA 및 3T3-L1 지방세포 공동배양에 의해 유도된 iNOS 단백질 및 mRNA 발현에 미치는 영향 20
3.2. BLE의 항염증 효과에 대한 기전 연구 22
3.2.1. BLE가 NF-κB 및 MAP kinases 신호전달 경로에 미치는 영향 22
3.2.2. BLE가 HO-1 단백질 및 mRNA 발현에 미치는 영향 24
3.2.3. BLE가 Nrf2 활성화에 미치는 영향 26
4. 요약 29
5. 참고문헌 32
(영문초록) 41
(국문초록) 43

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