아로니아는 신소득 작물로 우리나라 재배면적이 넓어지고 있다. 2014년 아로니아 농가에서 아로니아 잎에 점무늬병이 발생하였는데, 아로니아의 잎에 발병률이 높게 나타났다. 병의 원인을 찾기 위해 병반 초기 증상에서 병원균을 분리하였는데, 주로 Alternaria spp.가 분리되었다. 병원성을 검정하기위하여 아로니아에 분리된 균을 접종하니 병원성이 있음을 확인하였다. 아로니아 점무늬병에 관여하는 Alternaria spp.의 형태학적 특성과 생리학적 특성을 조사하였다. 형태학적 특성을 조사하기 위해 현미경 상으로 포자를 관찰하였다. 균주 14-358의 모양은 역 곤봉 모양으로 크기는 22-32 × 8-11 μm이며, 횡격막은 0-1개 사이로 있으며 종격 막은 2-4개가 측정되었다. 15-238의 모양은 달걀 모양으로 크기는 25-35 × 10-12 μm 이며, 횡격막은 1-2개, 종격 막은 1-4개가 측정되어 약간의 차이를 보였다. 분리 균을 배지, 온도, pH 별로 각각 조사하였다. Alternaria spp.는 CMA, MEA, OA, PDA, V8 배지 모두 생장이 좋으며 V8 배지에서 포자가 많이 형성되며, V8배지에서 색상이 크림색과 잿빛 색으로 나눠지는 것을 확인하였다. Alternaria spp.는 23-28℃에서 생육효과가 좋으며 비교적 고온인 30℃ 이상에서는 생육이 억제되는 것이 확인되었다. 또한, pH 5.0 - 9.0에서는 생육이 잘 자라며 pH 4.0과 pH 10.0에서는 생육이 억제되는 것을 확인하였다. Alternaria spp.의 정확한 동정을 위하여 ITS영역, RPB2, GPD, TEF 유전자의 염기서열을 분석하였다. RPB2에서 상동성이 0.8% 이상으로 두 종으로 나뉘는 것을 확인하였으며 RPB, GPD, TEF의 염기서열을 컴바인하여 계통수를 작성하니 Alternaria alternata, Alternaria tenuissima 두 종으로 나뉘어졌다. 기존에 블랙쵸크베리의 점무늬병에 관여하는 병원균으로 A. alternata가 보고되었다. 본 연구에서는 Alternaria alternata그룹의 Alternaria tenuissima도 점무늬병에 관여하는 것을 밝혔다. 본 연구를 기초자료로 활용하여 병원균 방제 약제 및 약제 내성 실험을 수행하고자 한다.
Black chokeberry (Aronia melanacarpa) is cold-hardy and deciduous shrub under the Rosacea family, coming into bloom in the spring. It can grow up to 2-3 m tall, which produce dark purplish blackberries. In August 2014, leaf spot symptoms on black chokeberry (Aronia melanocarpa) were observed in Korean farm as Danyang-gun, Gimje-si and Gochang-gun. It appeared as a circle or as an irregular brown spot, and Alternaria spp. was isolated from the infected leaves. Isolates were used to analyze for morphological characteristics, pathogenicity test, physiological characteristics and molecular characteristics. As a result of the pathogenicity test, black chokeberry leaves produced circular, brown spots, which were the same as the original symptoms, respectively. Their morphological characteristics were observed under an optical microscope. Spores of 14-358 were septate with 1-4 longitudinal septa and 1-2 diaphragm and spores of 15-238 were septate with 2-4 longitudinal septa and 0-1 diaphragm. They appeared transparent on corn meal agar, white to gray on malt extract agar and oat meal agar, whitish to ash on potato dextrose agar and v8 juice agar in color. The isolates were grown up well on 25℃, on pH 5.0 ? 9.0. Based on Molecular analysis, the isolates classified into A. alternata and A. tenuissima in A. alternata group. This study clarifies Alternaria tenuissima as the second leaf spot pathogen on black chokeberry (Aronia melanocarpa).
I. 서론 1II. 재료 및 방법 31. 이병 잎 채집과 병원균 분리 32. 아로니아 점무늬병균의 병원성 검정 33. 아로니아 점무늬병균의 형태학적 및 생리적 특성 43-1.점무늬병균의 형태학적 특성 43-2.배지종류에 따른 균총의 형태 43-3.균사생장에 미치는 온도의 영향 43-4.균사생장에 미치는 pH의 영향 54. 아로니아 점무늬병균의 분자생물학적 분석 54-1.Total genomic DNA 추출 54-2.Polymerase chain reaction (PCR) 및 염기서열 분석 54-3.아로니아 점무늬병균의 상동성 비교 및 유연관계 분석 8III. 결과 및 고찰 91. 아로니아 점무늬병의 병징 및 분리 92. 아로니아 점무늬병균의 병원성 검정 103. 아로니아 점무늬병균의 형태학적 및 생리적 특성 143-1.점무늬병균의 형태학적 특성 143-2.배지종류에 따른 균총의 형태 163-3.균사생장에 미치는 온도의 영향 163-4.균사생장에 미치는 pH의 영향 174. 아로니아 점무늬병균의 분자생물학적 분석 244-1.Polymerase chain reaction (PCR) 및 상동성 비교 244-2.아로니아 점무늬병균의 유연관계 분석 29Ⅳ. 적요 33Ⅴ. 참고문헌 34Ⅵ. 영문초록 38