밀리포어 필터를 이용한 자가부식형본딩시스템의 세포독성평가 :Cytotoxicity test of self-etching bonding system using Millipore filters

양경철

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자료유형: 학위논문

저자정보: 양경철 (연세대학교, 연세대학교 대학원)

지도교수: 김광만

발행연도: 2016

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2016

밀리포어 필터를 이용한 자가부식형본딩시스템의 세포독성평가

양경철 , 이정환 , 김미주 외 2명 대한치과재료학회 학술대회 2016.11 학술대회자료

밀리포어 필터를 이용한 자가부식형본딩시스템의 세포독성평가

양경철 치의 2016.01 학위논문

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상아질접착제는 치과용 레진을 상아질에 붙이는 데 사용되는 치과재료이다. 이 접착제는 필연적으로 상아세관을 통과하며 치수에 영향을 미칠 수 있다. 그러므로 본 연구에서는 상아질을 대체할 수 있는 밀리포어 필터를 이용한 자가부식형 접착제의 치수세포에 대한 독성을 평가하고자 하였다.
자가부식형 접착제 중 two step non-washable 제품인 Unifil bond와 SE bond, 그리고 one step non-washable 제품인 AQ bond와 One-up bond를 본 연구의 재료로 사용하였다. 스테인레스 스틸로 만들어진 인공 치수강 위에 3장의 (0.65 + 0.45 + 0.22 μm) 밀리포어 필터를 놓고 상아질접착제를 제조사의 지시대로 적용하였다. 24시간동안 필터를 통과하여 스테인레스 스틸로 만들어진 인공 치수강 내부의 증류수에 투과된 상아질접착제 투과물을 불멸화된 인간유래치수세포에 적용하여 효소활성시험법으로 상아질접착제의 세포독성을 평가하였다. 각 실험군 안에서의 통계적 유의차를 One-way ANOVA를 사용하여 분석하였고 사후검정으로는 Tukey test를 사용하였다 (P<0.05).
세포독성 시험결과 실험군 모두에서 통계적으로 유의하게 세포활성이 낮아지지 않았다 (P>0.05). 하지만 투과실험의 양성대조군인 1 g/mL 페놀을 적용한 군에서만 50%, 25%, 12.5% 희석용액의 경우 음성대조군에 비해 통계적으로 유의하게 세포활성이 낮았다 (P<0.05). 결론적으로 상아질대체재로써 밀리포어 필터를 이용한 상아질접착제의 독성평가 결과, 자가부식형 상아질접착제의 독성이 치수세포에 미치는 영향이 없었다. 이 연구에 사용된 자가부식형 상아질접착제는 본 시험 범위 내에서 치수에 위해성이 없이 쓸 수 있는 재료로 사료된다.

Dentin adhesive agents are essential dental materials for bonding composite resin to dentin. Recently, self-etching agents are widely used due to their relatively proper bonding ability without washing steps. This self-etching adhesive agent may pass through the dentinal tubules, which affects dental pulp tissue. Therefore, this study was to use Millipore filter as dentin substitutes for evaluating cytotoxicity of self-etching bonding agent.
The non-washable self-etching products with two steps (Unifil bond and SE bond) and one step (AQ bond and the One-up Bond) were chosen as the test materials of this present study. After applying self-etching bonding products according to the manufacturer’s instructions on the Millipore filter set consisting of three different pore sized sheets (0.65 + 0.45 + 0.22 μm), the solution indirectly penetrating substances for 24 hours at 37 °C in stainless steeled artificial pulp chamber including distilled water was gathered. Immortalized human dental pulp cells were cultured with different concentration of penetrating solution in culture media for 24 hours at 37 °C incubator. Then, cytotoxicity was evaluated by WST assay. One - way ANOVA with Tukey test as post hoc was used for observing significant differences among different concentrations of penetrating solution in the same material at a level of 0.05.
All concentration groups (6.25%, 12.5%, 25%, and 50%) from all experimental groups (UN, SE, AQ, and OU) and negative control with distilled water did not show significant differences in the cytotoxicity compared to 0%, which was absence of penetrating solution (P>0.05). However, 12.5%, 25%, and 50% of positive control showed significant difference compared to the 0% of counterpart (P<0.05).
In conclusion, cytotoxicity test with four kinds of self-etching agents and Millipore filters as dentin substitutes revealed that penetrating solution from each self-etching bonding agent did not affect to the cell viability of immortalized human dental pulp cells. Therefore, within the limitation of this study, the used four kinds of commercial self-etching bonding agents are considered as non-cytotoxic products to human pulp cells.

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