아사이베리(acai berry) 에탄올 추출물의 항산화 및 항염증 효과 :

김수연

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자료유형: 학위논문

저자정보: 김수연 (계명대학교, 계명대학교 대학원)

지도교수: 김배환

발행연도: 2016

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이용수17

이 논문의 연구 히스토리 (2)

2017

아사이베리 에탄올추출물의 항염증 효과

김수연 , 박교현 , 문현덕 외 3명 한국미용학회지 2017.08 학술저널

2016

아사이베리(acai berry) 에탄올 추출물의 항산화 및 항염증 효과

김수연 공중보건학과 2016.01 학위논문

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본 연구에서는 아사이베리 에탄올 추출물의 항산화 효과를 검증하고 RAW 264.7 cell과 12-o-tetradecanoyl phorbol-13-acetate(TPA) 급성염증 모델을 이용한 항염증 효능 연구를 수행하였다. 먼저 아사이베리 에탄올 추출물의 항산화 효능을 평가하기 위해 페놀성 화합물의 함량을 조사하였고 다양한 항산화계에서 시험물질 활성을 평가하였다. RAW 264.7 cell에서 MTT assay를 시행하여 세포 생존율을 측정하였고 lipopolysaccharide(LPS)를 처치 후 nitric oxide(NO)와 염증 매개성 사이토카인 중 하나인 interleukin-1α(IL-1α)의 분비량을 측정하여 아사이베리 에탄올 추출물이 RAW 264.7 cell에 미치는 독성 및 항염 효과를 확인 하고자 하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다.
아사이베리 에탄올 추출물은 총 28.8 μg/mL의 폴리페놀 함량을 보였으며 시험물질의 항산화 활성을 DPPH의 전자공여능, free radical 소거활성, SOD 유사활성 시험을 통해 확인한 결과 높은 항산화 효과를 볼 수 있었다. 한편, RAW 264.7 cell에서 아사이베리 에탄올 추출물은 2,000 μg/mL까지 세포 독성을 보이지 않았으며, NO 저해율과 IL-1α(cytokine)의 발현량을 측정한 결과 40.5%의 NO 저해율과 55.3%의 발현 억제율을 보였다. 이상의 결과로 아사이베리 에탄올 추출물의 항산화 활성과 항염 효과가 있음을 검증하였고 이를 바탕으로 동물실험에서 항염효과를 확인하고자 다음의 연구를 진행하였다.
ICR 마우스의 귀 부종을 유발하기 위해 1일 1회 3일 동안 TPA를 도포하였고 귀 부종에 대한 억제 효과를 조사하였다. 최종 물질 처치 24시간 후 귀 두께 및 귀 무게를 측정한 결과 TPA 처치군, 용매대조군 에서는 모두 증가하였으나 양성대조군인 dexamethasone은 높은 억제율을 보여주었고 아사이베리 에탄올 추출물 또한 농도 의존적으로 유의한 억제율을 보여주었다. 피부 조직 병리학적 관찰 결과는 다음과 같다. 표피의 두께는 TPA만 처치한 대조군과 용매대조군에서는 표피의 두께가 두꺼워지고 염증세포의 증가 양상을 보였으나 아사이베리 에탄올 추출물은 농도가 높아질수록 표피의 두께가 얇아지며 염증세포의 발현 또한 줄어드는 것을 볼 수 있었다. mast cell의 발현은 TPA 처치한 대조군과 용매대조군에서 높아지는 것을 관찰하였고 아사이베리 에탄올 추출물은 농도 의존적으로 mast cell의 발현이 줄어드는 것을 확인하였다.
이상의 결과를 종합해 볼 때 아사이베리 에탄올 추출물의 항산화 및 항염증의 효과가 있음을 검증하였고 화장품 조성물로서의 개발 및 사용가능성이 기대된다.

The purpose of this study is to investigate the anti-oxidative and anti-inflammatory effects of acai berry ethanol extract (ABEE) using in vitro and in vivo model.
In order to evaluate the anti-oxidative effects of ABEE, the total phenolic contents were quantified, and DPPH, ABTS radical scavenging ability, and superoxide dismutase (SOD) activity were measured. Subsequently, using the RAW 264.7 cells, the cell toxicity of ABEE was evaluated with or without LPS, and the anti-inflammatory effects of ABEE were also estimated by secretion of nitric oxide (NO) and interleukin-1α (IL-1α). Furthermore, by using LPS-induced mouse ear edema model, anti-inflammatory effects were also estimated by in vivo model.
From this study, the following results were obtained.The mean content of phenolic compounds in ABEE was 28.8 μg/mL, and ABEE showed DPPH electron donating activity of 60.5%, ABTS radical scavenging activity of 49.7%, and SOD activity of 24.7% at concentration of 1,000 μg/mL. The results indicated that ABEE would have significantly high anti-oxidative effects with dose dependancy in every assays, although the potency was weaker than a positive control.
In RAW 264.7 cell study, ABEE showed no toxic effects up to concentration of 2,000 μg/mL, and toxic effect of LPS was improved by ABEE.
The inhibition rate of LPS-induced NO secretion was increased by ABEE dose-dependently up to 40.5% at 2,000 μg/mL, and LPS-induced IL-1α secretion was decreased by ABEE in dose dependent manner.
In 12-o-tetradecanoyl phorbol-13-acetate (TPA) -induced acute inflammatory mouse ear edema model, the thickness and weight of ear were increased by TPA treatment. ABEE inhibited TPA-induced ear thickness and weight by 61.4% and 56.0% each at 10% concentration.
As in the histopathological examination of H&E staining, TPA induced the epidermis thickness and inflammatory cell infiltration, whereas 10% ABEE treatment group reduced the epidermis thickness and inflammatory cell infiltration. In case of toluidine blue staining, increased mast cells by TPA were reduced the expression level of mast cells.
In conclusion, this results indicated that ABEE might have anti-oxidative and anti-inflammatory effects in both in vitro and in vivo assays. The results would suggest possibilities that ABEE can be developed as an inflammatory agents for cosmetic bases in the future.

1. 서론 1
2. 재료 및 방법 4
2.1 시약 및 기기 4
2.2 시료 제조 및 추출 수율 측정 4
2.3 In vitro 항산화능 평가 5
2.3.1 총 폴리페놀 함량 5
2.3.2 DPPH 전자공여능 5
2.3.3 ABTS free radical 소거능 6
2.3.4 SOD 유사활성 6
2.4 RAW 264.7 cell을 이용한 항염증 평가 7
2.4.1 세포주 배양 7
2.4.2 세포독성 7
2.4.3 LPS 처치에 따른 세포독성 8
2.4.4 NO 생성 저해 9
2.4.5 세포 내 IL-1α 발현 억제 9
2.5 TPA 급성염증모델을 이용한 항염증 10
2.5.1 실험동물 10
2.5.2 실험군의 구성 11
2.5.3 급성염증유발 및 시료도포 12
2.5.4 귀 두께 변화 12
2.5.5 귀 무게의 비교 및 억제 12
2.5.6 피부조직 병리학적 관찰 13
2.5.6.1 Hematoxylin & Eosin(H&E) 염색 후 광학현미경 관찰 13
2.5.6.2 Toluidine blue 염색 후 광학현미경 관찰 13
2.6 통계처리 14
3. 연구결과 15
3.1 아사이베리 에탄올 추출물의 항산화 활성 15
3.1.1 총 폴리페놀 함량 및 추출 수율 15
3.1.2 DPPH 전자공여능 16
3.1.3 ABTS free radical 소거능 17
3.1.4 SOD 유사활성 18
3.2 RAW 264.7 cell을 이용한 항염증 효과 19
3.2.1 세포독성(MTT assay) 19
3.2.2 LPS 처치에 따른 세포독성 20
3.2.3 NO 생성 저해 21
3.2.4 세포 내 IL-1α 발현 억제 22
3.3 TPA 급성염증모델을 이용한 항염증 23
3.3.1 귀 두께 변화 23
3.3.2 귀 두께 억제율 24
3.3.3 귀 무게 변화 25
3.3.4 귀 무게 억제율 26
3.3.5 H&E 염색 후 조직병리학적 관찰 27
3.3.6 Toluidine blue 염색 후 조직병리학적 관찰 28
4. 고찰 29
참고문헌 32
영문초록 36
국문초록 39

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