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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

양봉석 (충남대학교, 忠南大學校 분석과학기술대학원)

지도교수
최준식 김윤중
발행연도
2015
저작권
충남대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수3

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

2015

PAMAM dendrimer Conjugated with Cell Penetrating Peptides for Enhanced Cell Uptake and Gene Delivery System
양봉석 분석과학기술학과 2015.01 학위논문

2014

PAMAM dendrimer Conjugated Amino Acid Originated from Cell Penetrating Peptides (CPPs)
양봉석 ,  최준식 한국고분자학회 학술대회 연구논문 초록집 2014.10 학술대회자료

2013

PAMAM Dendrimer with Bioresponsive Peptides as Novel Gene Delivery Carrier to Various Cell Lines
양봉석 ,  정진우 ,  최준식 한국고분자학회 학술대회 연구논문 초록집 2013.10 학술대회자료

초록· 키워드

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In this study, we introduced polyamidoamine (PAMAM) generation 4 conjugated with cell penetrating peptides (CPPs) consisting of Lysine-Phenylalanine-Phenylalanine (G4-KFF, G4-FFK) amino acid sequence to develop an outstanding nano-carrier for gene delivery. Cell penetrating peptides are well known to deliver biomolecules effectively into the cell, and believed to be originated from PTD (Protein-Transduction Domain) or MTS (Membrane-Trans locating Sequence) from virus. Generally, it has special cellular uptake mechanism without any damage to the cell membrane. For this reason, we conjugated cell penetrating peptides on the surface of PAMAM dendrimers in order to advantage of this property. DNA condensation efficiency of G4-KFF and G4-FFK was confirmed by agarose gel retardation assay. Then size of prepared polyplexes was analyzed by DLS and observed STEM and TEM image. Then cytotoxicity was evaluated in different cell lines; HeLa and HepG2 cells. We found transfection efficiency was remarkably higher in G4-KFF and G4-FFK in both the cell line compared with gold standard PEI 25 kDa transfection reagent with negligible cytotoxicity. Here we believe that our nano-carrier will be a promising non-viral vector to deliver therapeutic genes due to its greater cellular uptake mechanism.

목차

1. INTRODUCTION 1
2. MATERIALS AND REAGENTS 3
3. METHODS 4
3-1. Synthesis of PAMAM G4-Phe-Phe-Lys and PAMAM G4-Lys-Phe-Phe 4
3-2. DLS (Dynamic Light Scattering) measurement 6
3-3. Transmission electron microscopy and scanning transmission electron microscopy 6
3-4. Agarose Gel Retardation Assay and Picogreen Assay 7
3-5. Cytotoxicity Assay 7
3-6. CLSM (Confocal Laser Scanning Microscopy) 8
3-7. Cell Culture and Transfection Assay 8
4. Results and Discussion 10
4-1. Synthesis PAMAM G4 with FFK and KFF 10
4-2. Dynamic Light Scattering (DLS) measurement 12
4-3. Transmission electron microscopy and scanning transmission electron microscopy of PAMAM G4-FFK/plasmid DNA 14
4-4. Agarose Gel Retardation Assay and Picogreen Assay 16
4-5. Cytotoxicity assay 19
4-6. Cellular uptake of polyplexes 21
4-7. Transfection Efficiency 23
5. Conclusion 25
6. References 26
국문초록 28

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