배경 :　Fusidic acid와 mupirocin은 표재성 피부감염의 치료에 흔히 이용되는 국소 항생제이다. 국내의 경우 이들 항생제의 오남용이 심하여 원인 균주들의 내성률이 외국보다 높게 보고되고 있다. 최근에는 fusidic acid에 대한 내성률이 상대적으로 더 높아 mupirocin이 좀 더 널리 이용되고 있다. 2011년 retapamulin이 표재성 피부감염의 치료를 위한 국소 항생제로 국내에 출시되었다. 그러나 국내 임상 검체로부터 동정된 mupirocin에 내성인 methicillin-resistant Staphyloccous aureus (MRSA) 균주의 fusidic acid와 retapamulin에 대한 감수성과 이들 균주의 분자역학적 클론 관계는 아직 잘 알려져 있지 않다.

목적 : Mupirocin 내성 MRSA의 fusidic acid와 retapamulin에 대한 항균력을 평가하고, mupirocin으로 치료할 수 없는 mupirocin 고도 내성 MRSA 균주들의 분자역학적 클론 관계를 규명하고자 하였다.
방법 : 2011년 3월부터 2012년 5월까지 2개 대학병원 임상 검체로부터 동정된 황색 포도알균 중 Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) 가이드라인에 따라 디스크 확산법과 우무 선별법을 이용하여 MRSA를 동정하였고, 5 μg, 200 μg mupirocin 디스크를 이용하여 mupirocin 내성 균주를 동정 후, 우무 희석법을 이용하여 mupirocin, fusidic acid, retapamulin에 대한 최소 억제 농도 (Minimal inhibitory Concentration, MIC)를 측정하고 감수성을 평가하였다. MRSA임을 분자생물학적으로 확인하기 위해 PCR을 이용하여 femA와 mecA 유전자를 확인하였고, mupirocin 고도 내성 균주임을 확인하기 위해 mupA 유전자를 확인하였다. 동정된 mupirocin 고도 내성 MRSA 균주들의 분자역학적 클론 관계를 평가하기 위해 pulsed-field gel electrophoresis (PFGE)법을 이용하였다.

결과 : 총 497주의 MRSA가 동정되었고, 이 중 22주 (4.4%)가 mupirocin 내성이었다. 이들 균주 중 저도 내성 균주는 13주 (2.6%), 고도 내성 균주는 9주 (1.8%)였다. Mupirocin 고도 내성 균주에 대해 시행한 PFGE 양상은 5개의 군으로 분류되어 다양한 역학적 클론 관계임을 알 수 있었다. Mupirocin에 저도내성인 MRSA의 fusidic acid의 MIC 범위는 ≥128 ug/mL이었지만, mupirocin에 고도내성인 MRSA의 fusidic acid의 MIC 범위는 0.5-≥32 ug/mL이었고, MIC90은 ≥32 ug/mL이었다. Mupirocin에 저도 내성 또는 고도 내성을 보이는 균주의 retapamulin에 대한 MIC 범위는 0.5 ug/mL이었고 MIC90 은 0.5 ug/mL이었다. 결과적으로 mupirocin에 저도내성을 보이는 MRSA 13주 모두는 fusidic acid에 내성을 보였으나 retapamulin에는 모두 감수성을 보였다. Mupirocin에 고도내성을 보이는 MRSA 9주의 56%는 fusidic acid에 내성을 보였으나 retapamulin에는 모두 감수성을 보였다.

결론 : Retapamulin은 다양한 분자역학적 클론 관계를 갖는 mupirocin 고도내성 MRSA 균주를 포함한, 국내 mupirocin 내성 MRSA 균주에 매우 효과적으로 작용할 수 있는 항생제임을 확인할 수 있었고, fusidic acid는 mupirocin 고도 내성 MRSA 균주에서 mupirocin 저도 내성 MRSA 균주에서보다 감수성이 높음을 확인할 수 있었다.

Background　: Fusidic acid and mupirocin are commonly used antibiotics in treatment of superficial skin infection. Since the rate of misuse of these antibiotics is very high, resistance rates of pathogen are higher than those of other countries. Recently, mupirocin has been widely used in Korea because the resistance rate of fusidic acid is relatively high. In 2011, retapamulin was released in the country for treatment of superficial skin infection. However, in vitro activities of retapamulin and fusidic acid against mupirocin and methicillin-resistant Staphylococcus aureus clinical isolates from Korea are not well known.

Objective :　The aim of this study was to determine the activities of retapamulin and fusidic acid against mupirocin-resistant MRSA clinical isolates and to investigate the molecular clonality of high level mupirocin-resistant MRSA clinical isolates.

Methods : MRSA isolates were collected in 2011-2012 from two university hospitals in accordance with Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines using disk diffusion method and agar screening method. Then mupirocin-resistant strains of MRSA were detected using 5 ug, 200 ug mupirocin disk. These mupirocin-resistant MRSA clinical isolates were screened for MIC values to mupirocin, fusidic acid, and retapamulin by agar dilution method and susceptibility to those antibiotics was assessed. The isolates were confirmed by molecular biology to be MRSA by detection of the femA and mecA genes and to be high level mupirocin resistance by detection of the mupA gene through PCR assay. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) pattern of chromosomal DNA was tested after digestion with SmaⅠ to determine the epidemiologic molecular clonality of high-level mupirocin resistant MRSA isolates.

Results : A total of 497 MRSA strains were isolated and 22 strains (4.4%) were mupirocin-resistant MRSA. Of these, 9 (1.8%) were found to have high-level resistance to mupirocin, 13 (2.6%) had low-level mupirocin resistance. PFGE pattern analysis performed for high-level mupirocin- and methicillin-resistant clinical isolates of S. aureus showed five clusters indicating that the majority of the isolates are not closely related. The MIC range of fusidic acid for the low-level MUP-R MRSA isolates was ≥128 ug/mL, but the MIC range and MIC90 for the high-level MUP-R isolates were ≤0.5-≥32 ug/mL, and ≥32 ug/mL, respectively. The MIC ranges and MIC90s of retapamulin for both the low-level and high-level MUP-R MRSA isolates were 0.5 ug/mL and 0.5 ug/mL, respectively. All 13 low level MUP-R isolates were resistant to fusidic acid, but susceptible to retapamulin, whereas among the nine high-level MUP-R isolates 56% were resistant to fusidic acid, but all were susceptible to retapamulin.

Conclusion : Retapamulin is highly active against high-level mupirocin- and methicillin-resistant clinical isolates of S. aureus with different genetic background in Korea. Fusidic acid is more active against high-level mupirocin resistant MRSA than low-level mupirocin resistant MRSA.