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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

김승섭 (청주대학교, 청주대학교 대학원)

지도교수
강정훈
발행연도
2015
저작권
청주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

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본 연구에서는 노루궁뎅이버섯 (Hericium erinaceum; HE) 균사체를 인진쑥 (Artemisia capillaris; AC), 뽕잎 (Morus alba; MA), 비타민나무잎 (Sea Buckthorn; SBT)에 각각 배양하여 조제한 고체 발효물들의 열수 추출물이 생체고분자의 산화적 변형과 세포사멸을 보호할 수 있는 지를 관찰하였다.
노루궁뎅이 버섯균사체-천연식물 고체 발효물의 활성을 DPPH radical, ABTS radical, peroxyl radical 소거활성 측정을 통해 알아보았다. 그 결과 DPPH radical 소거활성에서 노루궁뎅이 버섯균사체-인진쑥 고체 발효물 (AC-HE)의 소거활성은 500 μg/mL 농도에서 61.73%, 노루궁뎅이 버섯균사체-뽕잎 고체 발효물 (MA-HE)은 500 μg/mL 농도에서 63%, 노루궁뎅이 버섯균사체-비타민나무잎 고체 발효물 (SBT-HE)은 500 μg/mL 농도에서 65.06%의 활성을 나타내었다. 또한 ABTS radical 소거활성에서는 AC-HE 50 μg/mL 농도에서 89.36%, MA-HE 250 μg/mL 농도에서 98.27%, SBT-HE 50 μg/mL 농도에서 99.51%의 활성을 나타내었다. Peroxyl radical 소거활성에서 AC-HE는 100 μg/mL 농도에서 44.18%의 활성을 나타내었고, MA-HE는 100 μg/mL 농도에서 38.95%, SBT-HE 100 μg/mL 농도에서 44.03%로 높은 radical 소거활성을 나타내었다.
노루궁뎅이 버섯균사체-천연식물 고체 발효물이 DNA (pUC 19)의 산화적 변형에 어떠한 영향을 미치는지를 확인하기 위하여 peroxyl radical을 처리하여 산화적 손상을 유발한 뒤 AC-HE, MA-HE, SBT-HE을 각각 처리한 결과 DNA의 산화적 손상을 효과적으로 억제하였다. 또한 AC-HE, MA-HE, SBT-HE는 human serum albumin (HSA)과 Cu,Zn-superoxide dismutase (Cu,Zn-SOD)의 산화적 손상을 효과적으로 억제하였다.
노루궁뎅이 버섯균사체-천연식물 고체 발효물의 항산화 기능을 세포수준에서 관찰하기 위하여 NIH3T3 fibroblast cell에 hydrogen peroxide (H2O2)을 처리하여 세포사멸을 유도하고, AC-HE, MA-HE, SBT-HE을 각각 처리하여 세포사멸에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay, DCF-DA염색법을 통해 확인한 결과 세포에 H2O2를 처리하였을 때의 세포생존율에 비하여 AC-HE 100 μg/mL 농도로 처리한 세포생존율은 11.47% 증가했으며, MA-HE 100 μg/mL 농도로 처리한 세포생존율은 8.0% 증가하였고, SBT-HE 100 μg/mL 농도로 처리한 세포생존율은 21.59% 높게 증가 되었다. 또한 AC-HE, MA-HE, SBT-HE을 각각 50 μg/mL 농도로 처리했을 경우 세포 내 ROS의 축적이 유의적으로 감소되었다.
본 연구 결과는 노루궁뎅이 버섯균사체를 이용한 천연식물 고체 발효물들이 산화적 스트레스에 의한 질병에서 항산화 활성 및 세포사멸 억제 현상을 나타내는데 영향을 미칠 것으로 사료된다.

목차

I. 서 론 ··········································································· 1
II. 본 론 ·········································································· 5
제 1 장 재료 및 방법 ···················································· 5
1. 실험 재료 ··································································· 5
2. 천연식물 고체 발효 ·················································· 6
3. 실험 방법 ··································································· 6
3. 1. DPPH radical 소거활성 ··································· 6
3. 2. ABTS radical 소거활성 ··································· 7
3. 3. Peroxyl radical 소거활성 ······························· 7
3. 4. DNA의 산화적 손상에 대한 보호 작용 ·········· 8
3. 5. 단백질의 산화적 손상에 대한 보호 작용 ······ 8
3. 6. 세포배양 및 세포생존율 측정 ························· 9
3. 7. ROS 생성 관찰 ·················································· 9
3. 8. 통계 분석 ···························································· 9
제 2 장 : 결과 및 고찰 ·················································· 11
1. 항산화 활성 측정 ······················································ 11
1. 1. DPPH radical 소거활성 ··································· 11
1. 2. ABTS radical 소거활성 ··································· 16
1. 3. Peroxyl radical 소거활성 ······························· 20
2. 생체고분자의 산화적 손상에 대한 보호 작용 ····· 25
2. 1. DNA의 산화적 손상에 대한 보호 작용 ········· 25
2. 2. 발효물에 의한 HSA 보호 작용 ······················· 29
2. 3. 발효물에 의한 Cu,Zn-SOD 보호 작용 ········· 34
3. 세포생존에 대한 발효물이 미치는 영향 ·············· 39
3. 1. H2O2에 의한 세포 생존율 측정 ····················· 39
3. 2. 발효물에 의한 ROS 생성억제 영향 ·············· 43
III. 결 론 ······································································· 47
IV. 참 고 문 헌 ····························································· 50
V. ABSTRACT ···························································· 63

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