목차

목 차
요약 ⅰ
표목차 ⅱ
그림목차 ⅲ
I. 서 론 1
Ⅱ. 실험 재료 및 실험 방법 3
1. 기기 및 시약 3
2. 황칠나무 잎의 추출 및 용매 분획 4
3. 황칠나무 잎 추출물의 항산화 활성 측정 5
3.1. DPPH법을 이용한 free radical 소거 활성 5
3.2. Luminol 발광법을 이용한 Fe3+-EDTA/H2O2 계에 있어서 활성산소 소거활성 (총항산화능) 6
4. 광용혈법을 이용한 세포보호 효과 측정 7
4.1. 적혈구 현탁액 제조 7
4.2. 황칠나무 잎 추출물의 광용혈 억제 효과 측정 7
5. 산화적 손상에 대한 황칠나무 잎 추출물의 세포 보호 효과 8
5.1. 세포 배양 8
5.2. 세포 독성 평가 8
5.3. UVB 조사 8
5.4. H2O2 처리 8
5.5. Rose bengal 처리 8
5.6. 세포 생존율 측정 9
5.7. DCFH-DA를 이용한 세포 내 ROS 측정 9
6. 황칠나무 잎 추출물의 멜라닌 생합성 저해능 측정 10
6.1. 세포배양 10
6.2. 세포 독성 평가 10
6.3. 세포의 형태학적 관찰 10
6.4. 멜라닌 함량 측정 10
6.5. Fontana-Masson 염색법 11
6.6. Tyrosinase 활성 측정 11
6.7. Western blot 12
7. 황칠나무 잎 추출물로부터 플라보노이드 분석 13
7.1. TLC 및 HPLC를 이용한 황칠나무 잎 추출물의 플라보노이드 분석 13
7.2. LC/ESI-MS/MS 및 1H-NMR을 이용한 황칠나무 잎 추출물의 플라보노이드 분석 14
8. 통계처리 14
Ⅲ. 실험 결과 및 고찰 15
1. 황칠나무 잎 추출물의 항산화 활성 15
1.1. DPPH법을 이용한 Free Radical 소거활성 15
1.2. 루미놀 발광법을 이용한 Fe3+-EDTA/H2O2 계에 있어서 활성산소 소거 활성 (총항산화능) 16
2. 1O2으로 유도된 사람 적혈구 세포 파괴에 대한 세포보호 효과 17
3. 황칠나무 잎 추출물이 HaCaT 세포 생존율에 미치는 영향 19
4. 자외선에 대한 황칠나무 잎 추출물의 HaCaT 세포 보호 효과 20
4.1. UVB 조사선량에 따른 세포 생존율 20
4.2. UVB로 유도된 세포 손상에 대한 황칠나무 잎 추출물의 보호 작용 21
4.3. UVB로 유도된 활성산소종 생성에 대한 황칠나무 잎 추출물의 소거 활성 23
5. H2O2 처리에 대한 황칠나무 잎 추출물의 HaCaT 세포 보호 효과 25
5.1. H2O2 농도별 처리에 따른 HaCaT 세포의 생존율 25
5.2. H2O2로 유도된 세포 손상에 대한 황칠나무 잎 추출물의 보호 작용 26
5.3. H2O2로 유도된 활성산소종 생성에 대한 황칠나무 잎 추출물의 소거 활성 28
6. Rose bengal 처리에 대한 황칠나무 잎 추출물의 HaCaT 세포 보호 효과 30
6.1. Rose bengal 농도별 처리에 따른 HaCaT 세포의 생존율 30
6.2. 1O2으로 유도된 세포 손상에 대한 황칠나무 잎 추출물의 보호 작용 31
6.3. 1O2로 유도된 활성산소종 생성에 대한 황칠나무 잎 추출물의 소거 활성 33
7. 황칠나무 잎 추출물이 B16F1 melanoma 세포 생존율에 미치는 영향 35
8. 황칠나무 잎 추출물의 멜라닌 생성 저해활성 측정 36
8.1. B16F1 melanoma 세포의 형태학적 관찰 36
8.2. B16F1 melanoma 세포의 멜라닌 함량 측정 37
8.3. Fontana-Masson 염색법으로 멜라닌 염색 39
9. 황칠나무 잎 추출물의 tyrosinase 저해 활성 측정 40
9.1. Cell-extracted tyrosinase 활성 저해능 40
9.2. Intra-cellular tyrosinase 활성 저해능 41
10. 황칠나무 잎 추출물의 멜라닌 합성 관련 단백질 발현 저해 효과 42
11. 황칠나무 잎 추출물의 성분분석 43
11.1. DM-3 (Rf 0.54) 의 구조결정 43
11.2. DM-4 (Rf 0.44) 의 구조결정 45
11.3. DM-9 (Rf 0.13) 의 구조결정 47
IV. 결 론 49
참고문헌 52