본 연구에서는 들깻잎, 콩잎, 청겨자잎, 적겨자잎 추출물의 암세포 증식 억제활성, 부착 비의존적 증식 억제 활성, apoptosis 유도 활성, 세포 주기 변화, 이동성 억제 활성, 접착 억제 활성 등의 항암 효과에 대하여 HCT116 인간 대장암 세포주와 H1299 인간 폐암 세포주를 이용하여 in vitro 수준에서 조사하였다. 1. HCT116 대장암 세포 또는 H1299 폐암 세포에 150, 300, 또는 600 μg/ml 농도의 들깻잎, 콩잎, 겨자잎 추출물을 48시간, 72시간, 또는 96시간 동안 처리하였을 때, 대조구 생존 대비 8.5-69.1%의 활성을 보여 유의적인 세포 증식 억제 활성을 보였다(p<0.05). 콩잎, 겨자잎 추출물에 의한 HCT116 대장암 세포 또는 H1299 폐암 세포의 부착 비의존적 증식 억제 활성은 대조구 활성 대비 2.0-2.7%로, 모든 시료에서 유의적인 세포 증식 억제 활성을 보였다(p<0.05). 특히 들깻잎 추출물에서는 100%의 부착 비의존적 증식 억제 활성을 보였다(p<0.05). 2. HCT116 대장암 세포 또는 H1299 폐암 세포에 150, 300, 또는 600 μg/ml 농도의 겨자잎, 들깻잎, 콩잎 추출물을 처리하였을 때 세포의 핵의 염색 강도가 대조구에 비해 유의적으로 증가하였다(대조구 대비 131.6-221.5%, p<0.05). 이는 잎채소 추출물이 부분적으로 apoptosis를 유도하기 때문인 것으로 생각된다. 3. 150, 300, 또는 600 μg/ml 농도의 들깻잎, 콩잎, 겨자잎 추출물에 의한 HCT116 세포 또는 H1299 폐암 세포의 이동성 억제 활성은 대조구 활성 대비 24.5-75.5%를 나타내었다. 특히 600 μg/ml 농도의 모든 잎채소 추출물에서 유의적인 이동성 억제 활성을 보였다(대조구 활성 대비 24.5-64.4%, p<0.05). 4. HCT116 세포에 150, 300, 또는 600 μg/ml 농도의 들깻잎, 콩잎, 겨자잎 추출물을 2시간 또는 18시간 처리하였을 때 모든 시간 및 모든 농도에서 유의적인 접착 억제 활성을 보였다(12.9-86.5%, p<0.05). 한편 H1299 세포에서는 150, 300, 또는 600 μg/ml 농도의 들깻잎, 콩잎, 겨자잎 추출물을 2시간 동안 처리하였을 때 최대 48.8%의 접착 억제 활성을 보였다. 앞으로 in vitro 수준에서 나타난 이와 같은 들깻잎, 콩잎, 겨자잎 추출물의 활성이 in vivo 수준에서도 재현될 수 있는지 여부가 확인되어야 할 것으로 생각되며, 이러한 항암 활성의 세부 작용기전에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다. 또한 항암활성에 중요한 역할을 하는 들깻잎, 콩잎, 겨자잎의 주요 기능 성분들이 분리?동정되어야 할 것으로 생각된다.
The aim of the study was to investigate anti-cancer activities of green mustard leaf (GML), red mustard leaf (RML), bean leaf (BL), and perilla leaf (PL) extracts in vitro. GML, RML, BL, and PL extracts significantly inhibited cell growth (by 30.9-91.5% in HCT116 human colon cancer cells and by 45.4-86.0% in H1299 human lung cancer cells at the concentration range of 150-600 μg/ml) and anchorage-independent cell growth (by 39.4-100% in HCT116 cells and by 27.3-100% in H1299 cells at 600 μg/ml concentration). GML, RML, BL, and PL extracts also changed nucleus morphology and increased nuclear staining intensity (by 55.7-121.5% in HCT116 cells and by 31.6-62.5% in H1299 cells at the concentration range of 150-600 μg/ml), indicating apoptosis-inducing activities. GML, RML, BL, and PL extracts also inhibited cell migration (by 24.5-66.7% in HCT116 cells and by 25.8-75.5% in H1299 cells at the concentration range of 150-600 μg/ml) and attachment (by 13.5-87.1 in HCT116 cells and by 48.8% in H1299 cells at the concentration range of 150-600 μg/ml). These results demonstrate anti-cancer activities of GML, RML, BL, and PL extracts in vitro.
목차
Ⅰ. 서 론 1Ⅱ. 이론적 배경 31. 잎채소 31) 들깻잎 32) 콩잎 43) 겨자잎 52. 암 61) 암의 원인 및 예방 72) 암화 과정 73) 인간 유래 암세포주 9Ⅲ. 연구재료 및 방법 111. 잎채소 추출물 제조 및 수율 측정 112. 암세포 배양 및 잎채소 추출물 처리 113. 암세포 형태 관찰 및 증식 측정 124. 암세포 apoptosis 관찰 135. 암세포 주기 관찰 146. 암세포 이동성 측정 147. 암세포 접착 측정 158. 통계처리 15Ⅳ. 실험결과 및 고찰 171. 추출 수율 172. 암세포 형태 변화 193. 암세포 증식 억제 활성 224. 암세포 부착 비의존적 증식 억제 활성 285. 암세포 apoptosis 유도 활성 326. 암세포 주기 변화 387. 암세포 이동성 억제 활성 418. 암세포 접착 억제 활성 45Ⅴ. 요약 및 제언 49Ⅵ. 참고문헌 51