PAMAM Derivatives Conjugated with RLRR Sequence Originated from Mouse Fibroblast Growth Factor 3 as Novel Gene Carrier :새로운 종류의 유전자 운반체로 섬유아세포 성장인자 3에서 유래된 RLRR 펩타이드 서열이 도입된 PAMAM 유도체

정진우

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자료유형: 학위논문

저자정보: 정진우 (충남대학교, 忠南大學校分析科學技術大學院)

지도교수: 최준식

발행연도: 2014

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2014

PAMAM Derivatives Conjugated with RLRR Sequence Originated from Mouse Fibroblast Growth Factor 3 as Novel Gene Carrier

정진우 분석과학기술학과 2014.01 학위논문

2013

Enhanced Gene Delivery effects of PAMAM dendrimer by Surface Modified with NLS from Fibroblast Growth Factor 3

정진우 , 이제일 , 최준식 한국고분자학회 학술대회 연구논문 초록집 2013.10 학술대회자료

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이 논문에서, 폴리아미도아민(PAMAM) 표면에 RRLR 펩타이드를 도입하여 물리적인 성질을 분석하였고, HEK293, NIH3T3, HeLa세포를 이용하여 유전자 운반체로서의 활성을 분석하였다. RRLR 펩타이드는 두 부분의 핵 수송 신호(NLS) 모티브를 포함하는 마우스 섬유아세포 성장인자 3 (FGF3) 단백질에서 유래 되었다. FGF3의 전체 펩타이드 서열은 RLRRDAGGRGGVYEHLGGAPRRRK 구성이 되어 있고, 각각 N-말단과 C-말단에 NLS기능을 하는 펩타이드인 RLRR과 RRRK를 가지고 있다. 특히, PAMAM G4-RRLR은 여러 세포 주에서 비교물질인 PEI 25 kDa, PAMAM G4-R 그리고 PAMAM G4에 비해 낮은 세포 독성과 향상된 트랜스펙션 효율을 나타내었다. 이러한 결과로 미루어볼 때, PAMAM 표면에 FGF 3 에서 유래된 NLS펩타이드를 도입하는 것은 유전자 치료를 위한 효과적인 비 바이러스 성 유전자 전달체 개발을 위한 가능성을 제공한다는 것을 확인하였다.

1. INTRODUCTION 1
2. MATERIALS AND METHOD 3
2.1. Materials
2.2. Synthesis of PAMAM G4-Arg-Arg-Leu-Arg Conjugate
2.3. Gel Retardation Assay and PicoGreen Assay
2.4. Particle Size and ζ-Potential Measurements
2.5. Heparin Competition Assay
2.6. Transmission Electron Microscopy
2.7. Cell Culture and In Vitro Transfection
2.8. Cytotoxicity Assay
2.9. Confocal Microscopy
3. RESULTS AND DISCUSSION 10
3.1. Synthesis of PAMAM G4-RRLR
3.2. Gel Retardation Assay and PicoGreen Assay
3.3. Dynamic Light Scattering and ζ-potential Measurements
of polyplexes
3.4. Heparin Competition Assay
3.5. Transmission Electron Microscopy
3.6. Transfection Efficiency and Cytotoxicity Assay Results
3.7. Confocal Microscopy
4. CONCLUSION 24
5. References 25
국문초록 28

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