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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

안동주 (호서대학교, 호서대학교 일반대학원)

지도교수
조경연
발행연도
2014
저작권
호서대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수7

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

초록· 키워드

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Myxobacteria are Gram-negative soil bacteria, production a large number of bioactive substances, and have been found more than 500 bioactive substances. Myxococcus species the most separated in koera.
I culture extracts of 217 Myxococcus strains isolated in Korea, compared their antimicrobial activity against Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus aureus. As a result, 2 strains of M. virescens showing antibacterial activity against P. aeruginosa, and antifungal activity against Candida albicans showing more than 54% in Myxococcus species(115 of 217 strains).
5 strains of Myxococcus species distinguish 16S rDNA sequences and the shapes of their fruiting bodies, the selected geographical origin and bioactive substances. The culture extracts produced from each strains, and get the result of two by high-performance liquid chromatography(HPLC). Firstly, production of substances peak was difference according to strains. Secondly, the same strains was similar in correlation between phylogenetic tree and substances peak. Production of substances of M. stipitatus KYC4013 was found antifungal substance melithiazol and antiviral substance phenalamide by high-resolution mass spectrometry(HR-MS). The substances was separate 60~80% gradient elution of acetonitrile, and the mostly produce in CYS medium for more than 7 days.
Also make use of M. stipitatus KYC577 was included antifungal activity and fluorescent pigment is made M. stipitatus KYC577-F01 and F02 by mariner transposon. M. stipitatus KYC577-F01 gene cluster analysis by PCR was inserted Gene locus STAUR_2580, predicted uncharacterized protein. M. stipitatus KYC577-F01 by HPLC analysis was separate not the fluorescent pigment but another substances. In the same way, phenalamide is cloning unknown gene cluster, but result is not what want.

목차

Ⅰ. 서 론 1
1. 점액세균이란? 1
2. 점액세균에 의한 생리활성물질 생산 1
3. 점액세균 균주의 분리 수집 3
4. Myxococcus 속 균주들의 형태학적 분석 4
5. Myxococcus 속 균주들에 의한 생리활성물질 생산 5
Ⅱ. 실험재료 및 방법 12
1. 실험재료 12
가. 균주 및 플라스미드 12
나. 배지 12
다. 시약 및 효소 12
2. 실험방법 20
가. 배양 조건 20
나. 배양추출물의 제조 20
다. 항미생물 활성 측정 20
라. 계통발생학적 동정 및 계통 분류 21
마. HPLC 분석 21
바. 전기영동 22
사. 염기서열 결정 22
아. 염기서열 분석 22
자. 형태학적 분석 22
차. 트랜스포존 22
a. 플라스미드 분리 및 확인 22
b. 점액세균의 트랜스포존 삽입 23
c. 트랜스포존 선별 24
d. 트랜스포존 확인 24
(1). 유전체 DNA 분리 24
(2). 제한효소 및 연결효소 처리 25
(3). PCR 25
카. 흡광 스팩트럼 조사 26
타. 고분해능 질량분석 26
Ⅲ. 결 과 27
1. Myxococcus 속 점약세균 균주선별 및 물질탐색 27
가. Myxococcus 속 균주들의 생리활성 측정 27
나. Myxococcus 속 균주들의 선별 29
다. 선별된 Myxococcus 속 균주들의 계통수 분석 31
라. 선별된 Myxococcus 속 균주들의 자실체 33
마. HPLC 피크별 균주들의 활성조사 35
바. M. stipitatus KYC4013의 고분자 질량분석 39
2. M. stipitatus KYC4013 물질 동정 및 최적화 42
가. HPLC 용리조건에 따른 M. stipitatus KYC4013의
물질 피크 양상 42
나. M. stipitatus KYC4013의 흡광 스팩트럼 45
다. 배지종류에 따른 M. stipitatus KYC4013의
물질생산 48
라. 배지조성에 따른 M. stipitatus KYC4013의
물질생산 50
3. M. stipitatus KYC577 및 KYC4013 유전자군 탐색 52
가. M. stipitatus KYC4013의 트랜스포존 삽입 52
나. M. stipitatus KYC577의 트랜스포존 삽입 55
Ⅳ. 고 찰 61
1. Myxococcus 속 점액세균 균주선별 및 물질탐색 61
2. M. stipitatus KYC4013 물질 동정 및 최적화 63
3. M. stipitatus KYC577 및 KYC4013 유전자군 탐색 65
참고문헌 68
영문초록 78

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