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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 신선호
- 발행연도
- 2014
- 저작권
- 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수1
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小續命湯은 한의학에서 중풍과 뇌손상의 치료에 전통적으로 사용되어왔다. 그러나 파킨슨병에 대한 小續命湯의 작용기전에 대한 연구는 거의 밝혀져 있지 않다. 따라서 본 연구는 사람 신경모세포종 SH-SY5Y 세포를 대상으로 파킨슨병을 유발하는 모델로 잘 알려진 N-methyl-4-phenyl-1,2,3,6- tetrahydropyridine (MPTP)로 유발된 세포독성에 대한 小續命湯의 보호효과 연구를 진행하였다. SH-SY5Y 세포에 小續命湯을 전처리한 결과 MPTP에 의해 유발된 세포생존력 감소, 활성산소종 증가, PARP 절단, p53의 인산화(Ser15) 증가, Caspase-3 및 -9의 활성화 및 미토콘드리아 막전위 소실 등 전형적인 세포고사(apoptosis)와 관련된 특징과 세포독성이 현저히 억제되었다. 더욱이 小續命湯을 SH-SY5Y 세포에 처리한 결과 MPTP에 의해 증가된 GSK3의 활성 억제와 관련된 GSK3α(S21)과 GSK3β(S9) 인산화와 전사조절 인자인 β-catenin의 안정화와 관련된 인산화가 현저히 억제되었다. 또한 小續命湯은 항산화효소의 발현을 조절하는 Nrf2의 발현을 증가시켰으며 세포 내 hydrogen peroxide을 소거하는 catalase의 발현을 증가시켰고 세포 내 소기관인 미토콘드리아의 생합성을 조절하는 PGC-1α의 발현을 현저히 증가시켰다. 반면 MPTP에 의해 증가된 산화적 자극을 유발하는 산화질소 생성효소 (iNOS)와 염증반응을 유발하는 Cox 2의 발현은 억제하는 것으로 나타났다.
본 연구에서는 사람 신경모세포종 SH-SY5Y 세포를 대상으로 파킨슨병을 유발하는 MPTP에 의해 유발된 도파민성 신경퇴화에 대하여 小續命湯이 효율적인 보효효과를 나타냈다. 따라서 뇌졸중, 치매와 같은 뇌세포의 산화적 손상에 의한 질환 치료에 小續命湯을 적용함으로서 보다 효과적으로 치료할 수 있을 것으로 보인다.
본 연구에서는 사람 신경모세포종 SH-SY5Y 세포를 대상으로 파킨슨병을 유발하는 MPTP에 의해 유발된 도파민성 신경퇴화에 대하여 小續命湯이 효율적인 보효효과를 나타냈다. 따라서 뇌졸중, 치매와 같은 뇌세포의 산화적 손상에 의한 질환 치료에 小續命湯을 적용함으로서 보다 효과적으로 치료할 수 있을 것으로 보인다.
목차
Ⅰ. 緖論 1Ⅱ. 實驗材料 및 方法 21. 재료 21) 약재 22) 시약 및 기기 23) 세포주 32. 방법 41) 시료 제조 42) SH-SY5Y 세포의 배양 43) 세포생존율 측정 44) 세포주기 분석 (Cell Cycle Analysis) 55) 세포 내 ROS (Reactive Oxygen Species) 측정 56) 미토콘드리아 막전위 측정 67) 세포 내 유리 칼슘 농도 측정 68) Western Blotting Analysis 79) 통계 처리 7III. 實驗結果 91. MPTP와 小續命湯에 의한 SH-SY5Y 세포생존율의 변화 92. 小續命湯이 세포생존율에 미치는 영향 113. 小續命湯이 MPTP에 의한 세포주기에 미치는 영향 134. 小續命湯이 MPTP에 의한 ROS 생성에 미치는 영향 155. 小續命湯이 Caspase 활성에 미치는 영향 206. 小續命湯이 GSK3 활성에 미치는 영향 227. 小續命湯이 항산화 단백질 발현에 미치는 영향 248. 小續命湯이 세포 내 에너지원에 미치는 영향 26IV. 考察 28Ⅴ. 結論 34參考文獻 35
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