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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

봉연주 (부산대학교, 부산대학교 대학원)

지도교수
박건영
발행연도
2014
저작권
부산대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수9

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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Probiotic effects of kimchi-derived lactic acid bacteria (LAB), Lactobacillus plantarum PNU (KCCM 11532P) and Leuconostoc mesenteroides PNU (KCCM 11353P), were observed. In addition, fermentation characteristics and health functionalities of kimchi by inoculating kimchi LAB starters were studied. We manufactured single LAB starter kimchi (Lab. plantarum pnuK, Lab. plantarum 3099K, Leu. mesenteroides pnuK), mixed LAB starter kimchi (Lab. plantarum pnu/Leu. mesenteroides pnuK, Lab. plantarum 3099/Leu. mesenteroides pnuK) with inoculum size of 1.0×106 CFU/g, as well as naturally fermented kimchi (NK), and fermented them for 6 days at 15°C to observe effects of kimchi LAB starter on fermentation characteristics of kimchi. In this study, we evaluated inhibitory effects of starter-kimchi on AOM/DSS induced colitis-associated colon cancer (CAC) using 6-week-old Balb/c male mice.
The Lab. plantarum PNU and Leu. mesenteroides PNU have tolerance in simulated gastric juice, small intestinal juice and heat conditions. Also it shows high adhesion to human intestinal epithelial cell and antioxidant/anticancer effects.
The pH and acidity of the early phase of fermentation were not different, but kimchi with the starters showed rapid changes in the pH and acidity 2 days after fermentation. As the fermentation progressed, the level of total aerobic bacteria and Lactobacillus sp. increased similarly with or without Lab. plantarum (LP) inoculation. However, the level of Leuconostoc sp. was high in kimchi inoculated with Leu. mesenteroides starter. In the sensory evaluation test, kimchi with starters received higher overall acceptability scores than those of NK, especially mixed starter added kimchi earned the highest score.
In DPPH and hydroxyl radical scavenging activity, kimchi with the starters exhibited higher activity than that of NK. In the MTT assay of HCT-116 and HT-29 human colon cancer cells, NK showed inhibition rates of 63.4 and 51.9%, but LPpnuK achieved 77.1 and 68.8%, respectively. This study showed that inoculating starters in kimchi increased in vitro antioxidant and anticancer activities, and single starter (LP) added kimchi revealed higher functionality than the kimchi with mixed starter.
Also, suppression of colon cancer was observed in all kimchi-administered groups in AOM/DSS induced colitis-associated colon cancer (CAC) mice, and weight-to-length ratio of colon and occurrence of tumor were the lowest in starter-added kimchi-administered groups. The groups showed less changes in histochemical investigation, compared with control group. Concentrations of serum pro-inflammatory cytokines were found the lowest from starter-added kimchi-administered group. Kimchis with the starters effectively up-regulated the gene expressions of the pro-apoptotic gene of Bax, but down-regulated Bcl-2 in the colon tissue. They promoted expressions of p53 and p21, and suppressed expressions of inflammation-related genes, iNOS and COX-2, compared with NK-administered group.
Taken together, it is expected that these kimchi-derived LAB may be used as probiotic source. And these results also suggest that these kimchi starters help to improve quality and health functionality of kimchi, however, more detailed studies and needed for the development of starters of kimchi.

목차

Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 4
1. 김치 유산균의 분리 동정 및 probiotic 효과 4
1) 유산균종의 분리 동정 4
(1) 김치 유산균의 분리 4
(2) 유산균종의 동정 4
2) 김치 유산균의 probiotic 효과 5
(1) 균주 및 배양 5
(2) 인공 위액 및 인공 담즙산에 대한 내성 6
(3) 열 안정성 7
(4) 장내 부착성 7
가. 암세포 배양 7
나. 장내 부착성 측정 8
(5) In vitro 항산화 기능성 측정 9
가. DPPH radical 소거활성 측정 9
나. Hydroxyl radical 소거활성 측정 9
(6) In vitro 항암 기능성 측정 10
가. 암세포 배양 10
나. MTT assay 10
다. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 12
2. 김치 유산균 starter를 첨가한 김치의 발효 특성 14
1) 시료 준비 14
(1) 배추김치 재료 14
(2) 김치 유산균 starter 준비 14
(3) 김치 제조 15
2) 이화학적 특성 측정 19
(1) pH 및 산도 19
(2) 총호기성 세균 및 유산균 수 19
(3) 조직감 20
3) 관능검사 21
3. 김치 유산균 starter를 첨가한 김치의 건강기능성 증진 효과 22
1) 김치 추출물의 제조 22
2) In vitro 항산화 기능성 측정 22
(1) DPPH radical 소거활성 22
(2) Hydroxyl radical 소거활성 22
3) In vitro 항암 기능성 측정 22
(1) 암세포 배양 22
(2) MTT assay 23
(3) Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 23
4) AOM/DSS로 유도된 Balb/c 마우스에서의 대장암 억제 효과 23
(1) 실험동물 23
(2) 대장암의 유도와 시료 투여 23
(3) 체중 측정 25
(4) 대장 길이 및 무게 측정 25
(5) 조직학적 소견 25
(6) Serum pro-inflammatory cytokines 측정 26
(7) RT-PCR을 이용한 대장 조직에서의 mRNA 발현 28
4. 통계분석 28
Ⅲ. 결과 및 고찰 29
1. 김치 유산균의 분리 동정 및 probiotic 효과 29
1) 유산균종의 분리 동정 29
2) 김치 유산균의 probiotic 효과 29
(1) 인공 위액 및 인공 담즙산에 대한 내성 29
(2) 열 안정성 31
(3) 장내 부착성 35
(4) In vitro 항산화 기능성 38
가. DPPH radical 소거능 38
나. Hydroxyl radical 소거능 38
(5) In vitro 항암 기능성 41
가. HT-29 인체 대장암 세포에서의 암세포 성장 저해 효과 41
나. Apoptosis 관련 유전자의 발현에 미치는 효과 43
2. 김치 유산균 starter를 첨가한 김치의 발효 특성 45
1) 발효 특성 45
(1) pH 및 산도의 변화 45
(2) 총호기성 세균 및 유산균 수 변화 47
(3) 조직감 변화 50
2) 관능검사 52
3. 김치 유산균 starter를 첨가한 김치의 건강기능성 증진 효과 54
1) In vitro 항산화 기능성 54
(1) DPPH radical 소거능 54
(2) Hydroxyl radical 소거능 54
2) In vitro 항암 기능성 57
(1) HCT-116 및 HT-29 인체 대장암 세포에서의 암세포 성장 저해 효과 57
(2) Bcl-2와 Bax 유전자의 발현에 미치는 효과 60
(3) p53과 p21 유전자의 발현에 미치는 효과 60
(4) iNOS와 COX-2 유전자의 발현에 미치는 효과 61
3) AOM/DSS로 유도된 Balb/c 마우스에서의 대장암 억제 효과 66
(1) 체중 변화 66
(2) 대장 길이 및 무게/길이 비율의 변화 66
(3) 종양의 생성 70
(4) 조직학적 소견 72
(5) Serum pro-inflammatory cytokines 수준 74
(6) 대장 조직 내 Bcl-2와 Bax 유전자 발현에 미치는 효과 77
(7) 대장 조직 내 p53과 p21 유전자 발현에 미치는 효과 79
(8) 대장 조직 내 iNOS와 COX-2 유전자 발현에 미치는 효과 81
Ⅳ. 요약 및 결론 83
참고문헌 85
Abstract 96

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