본 연구의 목적은 淸氣化痰丸 추출물이 고지방식이로 비만을 유도한 쥐의 생체 지질합성, 항산화 기능 및 전염증성 cytokine의 생산에 미치는 영향을 조사하는 것이다. 평균체중이 203.27±5.31 g의 Sprague-Dawely계 수컷 40두에게 고지방식이를 8주간 급여한 후, 체중이 400 g 이상인 32두를 선발하여, 평균체중이 유사하게 대조군 (100 ㎎/㎏ 생리식염수), 처리 1군 (100 ㎎/㎏ 淸氣化痰丸 추출물), 처리 2군 (200 ㎎/㎏ 淸氣化痰丸 추출물) 및 처리 3군 (300 ㎎/㎏ 淸氣化痰丸 추출물)으로 나누어 각 처리군당 8두 씩 임의 배치하여 4주간 실험을 진행하였다. 실험 종료일에 혈액 및 간장을 채취하여, 혈장과 간장의 지질, 전염증성 cytokine의 농도, 항산화 능력 및 유전자 발현을 조사하였다.
1. 혈장 Free fatty acid (FFA), Triglyceride (TG), Total cholesterol 과 LDL-cholesterol 농도는 대조군과 비교하여 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 낮은 값을 나타내었다. 혈장 HDL-cholesterol 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군이 대조군보다 높은 경향을 나타내었다.
2. 간장 Total cholesterol 및 TG 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 유의하게 낮았다.
3. 혈장 및 간장 TBARS 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 낮은 경향을 나타내었고, GSH-Px, SOD 및 CAT 활성치는 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 높은 경향을 나타내었다.
4. 혈장 GOT 및 GPT의 활성치는 전 처리군 간에 유의한 차이를 나타내지 않았다.
5. 혈장 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 낮은 경향을 나타내었고, 혈장 IL-10 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군에서 높은 경향을 나타내었다. 혈장 NO 농도는 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 낮은 값을 나타내었다.
6. Apo-B 및 Apo-E는 정상군과 비교하여 비만군이 높은 gene expression을 나타내었으나, 비만군 간에서는 대조군과 비교하여 淸氣化痰丸 추출물 처리농도가 증가함에 따라 낮은 gene expression을 나타내었다. Leptin gene expression은 정상군보다 비만군들 모두가 높은 gene expression을 나타내었으며, 비만군 간에서는 淸氣化痰丸 추출물 처리농도에 따른 확연한 차이를 볼 수 없었다. β-actin expression에 대한 Apo-B의 gene expression 비율은 淸氣化痰丸 추출물 처리군 모두가 대조군보다 유의하게 낮은 값을 나타내었다. β-actin expression에 대한 Apo-E의 gene expression 비율은 300 ㎎/㎏ 淸氣化痰丸 추출물 처리군이 대조군보다 유의하게 낮은 값을 나타내었고, β-actin expression에 대한 Leptin의 gene expression 비율은 대조군을 비롯한 전 처리군 모두가 일관성 있는 결과를 나타내지 않았다.
이상의 결과를 종합해보면 淸氣化痰丸 추출물이 생체 지질합성, 항산화 기능 및 전염증성 cytokine의 생산에 있어서 생체기능에 긍정적으로 작용하여 비만억제, 치료 및 비만과 관련된 생체 대사이상의 예방과 치료에 효과적일 것으로 사료된다.
Effects of Cheunggihwadamhwan Extract on Lowering Lipid, Antioxidation and Production of Proinflammatory Cytokines in Rats Fed on High Fat Diet
Han, Lee Dept. of Korean Medicine Graduate School of Sangji University Directed by Yun-yeop Cha, K.M.D., Ph.D.
Objectives The purpose of this study was to investigate the effects of Cheunggihwadamhwan(CGHDH) extract on lowering lipid, antioxidation and production of proinflammatory cytokines in rats fed on high fat diet.
Methods 40 Male Sprague-Dawley rats were fed on high fat diet for 8weeks and 32 rats(above 400g) were randomly divided into 4 groups(8 mice in each group) : control group, 100 mg/Kg CGHDH group, 200 mg/Kg CGHDH group, 300 mg/Kg CGHDH group. We fed a control group of rats a basal diet and administered normal saline(100 ㎎/㎏, 1 time/1 day) for 4 weeks. And We fed each experimental group of rats basal diet and administered an extract of Cheunggihwadamhwan extracts(100 ㎎/㎏, 200 ㎎/㎏, 300 ㎎/㎏, 1 time/1 day) for 4 weeks. At the end of the experiment, the rats were sacrificed to determine their chemical composition. We measured lipid in plasma and liver, concentration of proinflammatory cytokines, antioxidative activity and gene expression . The gene expression level was investigated by the way of reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).
Results 1. Concentration of plasma FFA, plasma TG, plasma total cholesterol and plasma LDL-cholesterol showed a significant decrement in Cheunggihwadamhwan groups. However, concentration of plasma HDL-cholesterol showed a significant increment in 200, 300 mg/kg Cheunggihwadamhwan groups.
2. Concentration of liver total cholesterol and liver TG showed a significant decrement in Cheunggihwadamhwan groups.
3. Concentration of plasma TBARS showed a significant decrement in all Cheunggihwadamhwan groups. Concentration of liver TBARS showed a significant decrement in 200, 300 mg/kg Cheunggihwadamhwan groups. Concentration of liver GSH-Px, SOD and CAT showed a tendency to decrease in all Cheunggihwadamhwan groups.
4. Plasma GOT activity and Plasma GPT activity showed no significant difference in all the treatment groups.
5. Concentration of plasma IL-1β, plasma IL-6, TNF-α and NO, showed a tendency to decrease in all Cheunggihwadamhwan groups. Concentration of plasma IL-10 showed a tendency to increase in all Cheunggihwadamhwan groups.
6. In the analysis of reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR), the gene expression of Apo-B and Apo-E in the Cheunggihwadamhwan groups showed a low expression than that of control group. However, the gene expression of leptin showed no significant difference in all the treatment groups. The ratio of Apo-B expression per β-actin expression in the showed a significant decrement in all Cheunggihwadamhwan groups. The ratio of Apo-E expression per β-actin expression in the showed a significant decrement in 300 mg/kg Cheunggihwadamhwan groups. The ratio of leptin expression per β-actin expression showed no significant difference among all treatment groups.
Conclusions According to this study, the extract of Cheunggihwadamhwan showed a positive effect of lowering lipid, antioxidation and a control of producing proinflammatory cytokines.
Key words Cheunggihwadamhwan, Lowering lipid, Antioxidation, Inflammatory.
목차
List of tables ⅰList of figures ⅱ국문초록 ⅲⅠ. 서 론 1Ⅱ. 재료 및 방법 31. 실험동물, 실험군 및 비만유도 32. 식이급여 33. 淸氣化痰丸 추출물 및 투여 54. 채혈 및 간장 채취 75. 시료 분석 71) 혈장 및 간장의 지질농도 및 구성 72) 혈장 및 간장의 Thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) 농도 73) 간장 Glutathione peroxidase (GSH-Px) 활성치 84) 간장 Superoxide dismutase (SOD) 활성치 85) 간장 Catalase (CAT) 활성치 96) 혈장 Glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) 및 Glutamic pyruvic transaminase (GPT) 활성치 97) 혈장 Cytokines 농도 98) 혈장 Nitric oxide (NO) 농도 99) RT-PCR (Reverse transcription-polymerase chain reaction) 분석 106. 통계처리 11Ⅲ. 결과 121. 혈장 Free fatty acid (FFA) 및 Triglyceride (TG) 농도 122. 혈장 Cholesterol 농도 133. 간장 Total cholesterol 및 Triglyceride (TG) 농도 144. 혈장 및 간장 Thiobabituric acid reactive substance (TBARS) 농도 155. 간장 Glutathione peroxidase (GSH-Px), Superoxide dismutase (SOD) 및 Catalase (CAT) 활성치 156. 혈장 Glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) 및 Glutamic pyruvic transaminase (GPT) 활성치 177. 혈장 Cytokines 농도 188. 혈장 Nitric oxide (NO) 농도 199. Apo-B, Apo-E 및 Leptine gene expression 19Ⅳ. 고찰 24Ⅴ. 결론 30참고문헌 32Abstract 43